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如何提高立體顯微鏡的分辨率呢

來源:似空科學儀器(上海)有限公司   2019年11月26日 13:19  
  立體顯微鏡由于試樣被觀察表面與工作臺表面重合,因此與試樣高度無關,使用方便,儀器結構緊湊,外形美觀大方,儀器底座支承面積較大,彎臂堅固,使儀器的重心較低安放平穩(wěn)可靠,由于目鏡與支承面呈45°傾斜,使觀察舒適。
 
  用于鑒別和分析各種金屬和合金材料的組織結構,立體顯微鏡廣泛應用在工廠或實驗室進行鑄件質量的鑒定;原材料的檢驗或材料處理后的金相組織分析;以及對表面噴涂等一些表面現(xiàn)象進行研究工作,對熱處理后的材料作一般金相組織的研究工作。顯微鏡成像清晰,視野寬廣,整體設計符合人機功能,適合長時間操作。
 
  人眼的分辨率只有1/10mm,那么比1/10mm小的物體或比1/10mm近的兩個微小物體的距離,人眼就無法分辨了。所以出現(xiàn)了從簡單的宏觀放大鏡到微觀觀測的光學顯微鏡,繼而電子顯微鏡。立體顯微鏡的分辨率定義是指在標本上能清楚分辨的兩個小點之間的小距離。其計算公式為:
 
  D=0.61λ/NA
 
  式中:D為分辨率(um);λ為光源波長(um);NA為物鏡的數(shù)值口徑(也稱鏡口率)。
 
  由公式可得到,立體顯微鏡的分辨率決定于入射光源的波長以及所匹配物鏡的數(shù)值孔徑。由此可知,提高光學顯微鏡的方法:
 
  1、增加物鏡的數(shù)值孔徑NA.
 
  數(shù)值孔徑NA=n*sin(u)
 
  式中,n為物鏡與標本之間的介質折射率;u為物鏡的二分之一孔徑角。因此,從光學設計上適當采用較大的孔徑角,或者增大折射率成為常見的提高立體顯微鏡分辨率的方法。一般低倍物鏡如10X以下其介質采用空氣,折射率為1,即干燥系物鏡;水浸介質是蒸餾水,其折射率為1.33;油浸物鏡介質是香柏油或其它透明油,其折射率一般在1.52左右,接近透鏡和載玻片的折光率,如Olympus的100X油鏡。水浸物鏡和油浸物鏡不僅放大倍數(shù)高而且由于使用高折射率的介質,從而提高物鏡的分辨率。
 
  2、降低光源波長。
 
  可見光較短波長為390nm,若用此波長的紫外光作為照明光源,可使光學顯微鏡的分辨率降低至0.2um。但是由于大多數(shù)普通材料的玻璃會大量吸收340nm以下波長的光,紫外光經過大量衰減無法形成清晰、明亮的圖像。因此不得不使用石英(可透過低達200nm的紫外光)、熒石(可透過低達185nm的紫外光)等價格昂貴的材料,并且紫外光顯微鏡不能用肉眼進行觀察,甚至受觀測樣品的限制,再加上昂貴的造價,所以這種提高立體顯微鏡分辨率的方式由于其自身的局限性而不受廣泛應用。

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