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液相色譜分析員習慣性錯誤 有哪些

來源:北京京科瑞達科技有限公司   2019年11月29日 09:59  

液相色譜對于多數人來說都是很好上手的儀器了,但是就算是經驗豐富的 液相色譜分析員習慣性錯誤 都有不少,經常導致一些儀器故障。方便快捷的分析過程固然重要,但是為了多做樣品而忽略了一些*的步驟,往往得不償失,哪些操作不能做?哪些懶兒不能偷?那些小概率的故障師傅沒教怎么辦?

 

下面讓京科瑞達二手儀器為匯總分析員習慣性錯誤都有哪些!

 

流動相不過濾

 

因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相應在玻璃容器內蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore濾膜(0.2μm或0.45μm)等濾器。泵的入口都應連接砂濾棒。輸液泵的濾器應經常清洗或更換。

 

使用后沒有及時清洗泵

 

流動相不應含有任何腐蝕性物質,含有緩沖液的流動相不應保留在泵內,尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內,由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。

因此,泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相,可以是甲醇或甲醇-水)。

 

流動相走空

 

泵工作時要留心防止溶劑瓶內的流動相被用完,否則空泵運轉也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán),終產生漏液。

 

沒有流動相流出,又無壓力指示怎么辦?

 

可能是泵內有大量氣體,這時可打開泄壓閥,使泵在較大流量(如5ml/min)下運轉,將氣泡排盡,也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。另一個可能原因是密封環(huán)磨損,需更換。

 

梯度洗脫的流動相選擇不當

 

要注意溶劑的互溶性,不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動相。有些溶劑在一定比例內混溶,超出范圍后就不互溶,使用時更要引起注意。

當有機溶劑和緩沖液混合時,還可能析出鹽的晶體,尤其使用磷酸鹽時需特別小心。

 

忽略的空白梯度洗脫

 

梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,以保證良好的重現性。進行樣品分析前要進行空白梯度洗脫,以辨認溶劑雜質峰,因為弱溶劑中的雜質富集在色譜柱頭后會被強溶劑洗脫下來。

用于梯度洗脫的溶劑需要脫氣,以防止混合時產生氣泡。

 

忽略了溶劑混合所帶來的粘度變化

 

混合溶劑的粘度常隨組成而變化,因而在梯度洗脫時常出現壓力的變化。例如甲醇和水粘度都較小,當二者以相近比例混合時粘度增大很多,此時的柱壓大約是甲醇或水為流動相時的兩倍。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過輸液泵或色譜柱能承受的zui大壓力。

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