小鼠纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒

Mouse TAFI ELISA Kit

特異性：本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的，且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。

有效期： 6 個(gè)月

預(yù)期應(yīng)用： ELISA 法定量測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

說(shuō)明

1 ．試劑盒保存： -20 ℃（較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）； 2-8 ℃（頻繁使用時(shí)）。

2 ．濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

3 ．中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處，請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

4 ．剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

實(shí)驗(yàn)原理

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、 HRP 標(biāo)記的親和素，經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物 TMB 顯色。 TMB 在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（ OD 值），計(jì)算樣品濃度。

試劑盒組成及試劑配制

1.          酶聯(lián)板（ Assay plate  ）：一塊（ 96 孔）。

2.          標(biāo)準(zhǔn)品（ Standard ）： 2 瓶（凍干品）。

3.          樣品稀釋液（ Sample Diluent ）： 1 × 20ml/ 瓶。

4.          生物素標(biāo)記抗體稀釋液（ Biotin-antibody Diluent ）： 1 × 10ml/ 瓶。

5.          辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （ HRP-avidin Diluent ）： 1 × 10ml/ 瓶。

6.          生物素標(biāo)記抗體（ Biotin-antibody ）： 1 × 120 μ l/ 瓶（ 1 ： 100 ）

7.          辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（ HRP-avidin ）： 1 × 120 μ l/ 瓶（ 1 ： 100 ）

8.          底物溶液（ TMB Substrate ）： 1 × 10ml/ 瓶。

9.          濃洗滌液（ Wash Buffer ）： 1 × 20ml/ 瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋 25 倍。

10.      終止液（ Stop Solution ）： 1 × 10ml/ 瓶（ 2N H 2 SO4 ）

人細(xì)菌性陰道病（BV）Elisa試劑盒 實(shí)驗(yàn)操作步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。如樣品濃度過(guò)高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)允箻悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔加待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗小鼠IgG工作液
100μl（取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃，60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)孔內(nèi)有明顯藍(lán)色，即可終止）。
5. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
6. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行檢測(cè)。