国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>操作使用>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書

來(lái)源:上海研謹(jǐn)生物科技有限公司   2019年12月11日 19:26  

考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白含量測(cè)定試劑盒說(shuō)明書

可見分光光度法

注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定,

確保蛋白濃度在0~1000µg/ml范圍內(nèi)。

測(cè)定意義

樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。

測(cè)定原理

在酸性溶液中,考馬斯亮藍(lán)G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合形成藍(lán)色復(fù)合物;該復(fù)合物在595nm處有大吸收峰, 其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。該方法靈敏度高,適合微量蛋白質(zhì)分析。

自備儀器和用品

離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、移液器、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。

試劑組成和配制

試劑一:液體×1 瓶,4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1 瓶,4℃保存。

樣品中可溶性蛋白質(zhì)提取

1. 液體樣品:澄清無(wú)色液體樣品可以直接測(cè)定。

2. 組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g組織,加入1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水)冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即待測(cè)液。(動(dòng)物樣品常常需要稀釋)

3. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間 3min);然后 8000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測(cè)。

測(cè)定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min,蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管:取1mL玻璃比色皿,加入200μL蒸餾水,1000μL試劑一,混勻后室溫靜置10min,

于595nm比色,10~20min 完成比色,記為A空白管。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取1mL玻璃比色皿,加入200μL標(biāo)準(zhǔn)液,1000μL試劑一,混勻后室溫靜置10min,

于595nm比色,10~20min 完成比色,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 測(cè)定管:取1mL玻璃比色皿,加入200μL待測(cè)液,1000μL試劑一,混勻后室溫靜置10min,

于595nm比色,10~20min完成比色,記為A測(cè)定管。

注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。

 

 

 

 

計(jì)算公式:

Cpr(µg/mL)= C標(biāo)準(zhǔn)管×(A測(cè)定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

=50×(A 測(cè)定管-A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管)

C 標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)品蛋白質(zhì)濃度,50μg/mL。

注意事項(xiàng):

1.加考馬斯亮藍(lán)后,在10~20min 內(nèi)吸光值相對(duì)較穩(wěn)定,因此須在10~20min 完成比色。

2.不宜用石英比色皿,可用玻璃或塑料比色皿,測(cè)完成后立即用 95%乙醇沖洗。

3.測(cè)定前用1~2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),確保蛋白濃度在0~1000µg/ml 范圍內(nèi),否則需要做相應(yīng)稀釋,使得稀釋后的結(jié)果在 0~1000µg/ml 范圍內(nèi),然后再乘以稀釋倍數(shù)。

鏈霉素(Strep)ELISA檢測(cè)試劑盒

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
资中县| 名山县| 侯马市| 花莲市| 绥阳县| 玉门市| 峡江县| 元朗区| 新化县| 乌什县| 漯河市| 绥江县| 封开县| 永平县| 鞍山市| 龙口市| 孝感市| 兖州市| 丽江市| 泸西县| 积石山| 临洮县| 芒康县| 秭归县| 虹口区| 云林县| 云南省| 平利县| 巴塘县| 新泰市| 海淀区| 团风县| 庆阳市| 井冈山市| 木兰县| 增城市| 台南市| 普陀区| 娄底市| 南澳县| 堆龙德庆县|