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石蠟冰凍包埋及切片技術(shù)服務(wù)

來源:上海創(chuàng)凌生物科技有限公司   2019年12月18日 10:53  

技術(shù)服務(wù)介紹

石蠟切片(paraffin section)組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中廣泛應(yīng)用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法,而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中。教學(xué)中,光鏡下觀察切片標(biāo)本多數(shù)是石蠟切片法制備的?;畹募?xì)胞或組織多為無色透明,各種組織間和細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差,在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出;組織離開機(jī)體后很快就會(huì)死亡和產(chǎn)生組織,失去原有正常結(jié)構(gòu),因此,組織要經(jīng)固定、石蠟包埋、切片及染色等步驟以免細(xì)胞組織死亡,而能清晰辨認(rèn)其形態(tài)結(jié)構(gòu)。

新鮮組織經(jīng)過固定取材脫水透明浸蠟后用特定的包埋模具將前期處理的組織塊與融化的石蠟一起包埋成組織蠟塊的過程稱為組織取材包埋。

技術(shù)服務(wù)流程:

組織石蠟包埋切片實(shí)驗(yàn)步驟

1、取材:新鮮組織固定于4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風(fēng)櫥內(nèi)用手術(shù)刀將目的部位組織修平整,將修切好的組織和對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽放于脫水盒內(nèi)。

2、脫水:將脫水盒放進(jìn)吊籃里于脫水機(jī)內(nèi)依次梯度酒精進(jìn)行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min-無水乙醇II 30min-醇苯5-10min-二甲苯I 5-10min-二甲苯II 5-10min-蠟I 1h-蠟II 1h-蠟III 1h。

3、包埋:將浸好蠟的組織于包埋機(jī)內(nèi)進(jìn)行包埋。先將融化的蠟放入包埋框,待蠟?zāi)讨皩⒔M織從脫水盒內(nèi)取出按照包埋面的要求放入包埋框并貼上對(duì)應(yīng)的標(biāo)簽。于-20°凍臺(tái)冷卻,蠟?zāi)毯髮⑾瀴K從包埋框中取出并修整蠟塊。

4、切片:將修整好的蠟塊置于石蠟切片機(jī)上切片,片厚4μm。 切片漂浮于攤片機(jī)40℃ 溫水上將組織展平,用載玻片將組織撈起,并放進(jìn)60℃ 烘箱內(nèi)烤片。待水烤干蠟烤化后取出常溫保存?zhèn)溆谩?/span>

冰凍切片制片實(shí)驗(yàn)步驟

1、 組織固定:新鮮組織固定于4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風(fēng)櫥內(nèi)用手術(shù)刀將目的部位組織修平整。

2、 脫水:將修切好的組織放于15%的蔗糖溶液內(nèi)4°冰箱脫水沉底后轉(zhuǎn)入30%的蔗糖溶液內(nèi)4°冰箱脫水沉底。

3、 OCT包埋:將脫好水的組織取出用濾紙將表面水稍吸干后切面朝上放于包埋臺(tái)上,組織周圍滴上OCT包埋劑,將包埋臺(tái)放在冰凍切片機(jī)的速凍臺(tái)上速凍包埋,OCT變白變硬后即可進(jìn)行切片。

4、 切片:將包埋臺(tái)固定于切片機(jī)上,先粗切將組織面修切平整后即可開始切片,切片厚°8-10μm。將干凈的載玻片平放于切出的組織片上方即可將組織貼于載玻片上。-20°保存?zhèn)溆谩?/span>

客戶須知

 1、新鮮組織盡快放入固定液固定

 2、固定液的體積至少是固定組織體積的10倍

 3、組織取材厚度1-3mm

實(shí)驗(yàn)周期

本公司常規(guī)實(shí)驗(yàn)周期為15個(gè)工作日。(不含送貨時(shí)間)

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)

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