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人Ⅲ型原膠原N端前肽(PⅢNP)ELISA試劑盒

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2019年12月26日 09:52  

上海琛藝實業(yè)有限公司elisa試劑盒生產(chǎn)廠家,檢測種屬:大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨等。種屬齊全,現(xiàn)貨直銷。產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月,我司elisa試劑盒為*批次現(xiàn)貨供應。各種elisa試劑盒提供免費待測業(yè)務。

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒特點:

一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、節(jié)省實驗經(jīng)費。
ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢。

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒說明書:

檢測原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附

試驗(ELISA)。往預先包被S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

酶標儀(450nm)

高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

37℃恒溫箱

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒人膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。

實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,終結果乘以5才是樣本實際濃度。

 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒組成:

名稱96孔配置48孔配置備注微孔酶標板12孔×8條12孔×4條無標準品0.3mL*6管0.3mL*6管無樣本稀釋液6mL3mL無檢測抗體-HRP10mL5mL無20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋底物A6mL3mL無底物B6mL3mL無終止液6mL3mL無封板膜2張2張無說明書1份1份無自封袋1個1個無

注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、1、2、4、8、16μmol/L試劑的準備 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。洗板方法

 手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;樣本孔加待測樣本50μL。

樣本孔先加待測樣本1

0μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果判斷 繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒性能:

 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。

 靈敏度:*檢測濃度小于0.1μmol/L。

 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于15%。

 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

 有效期:6個月
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