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iTRAQ(TMT)-多通量定量分析服務(wù)

來(lái)源:上海創(chuàng)凌生物科技有限公司   2019年12月26日 13:26  

、iTRAQ(TMT)-多通量定量分析服務(wù)簡(jiǎn)介:

iTRAQ (Isobaric Tag for Relative and Absolute Quantitation) 和 TMT(Tandem Mass Tag) 分別是由AB SCIEX和Thermo Scientific公司分別開發(fā)的、對(duì)trypsin酶解肽段進(jìn)行標(biāo)記的試劑盒。標(biāo)記肽段通過(guò)LC-MS,能同時(shí)實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)的鑒定和對(duì)蛋白質(zhì)的相對(duì)定量分析。

iTRAQ和TMT的技術(shù)原理*一樣,區(qū)別在于:(1)生產(chǎn)商不同;(2)分子結(jié)構(gòu)稍有差異;(3)標(biāo)記通量有差異。iTRAQ有4標(biāo)(4-plex)和8標(biāo)(8-plex)2種規(guī)格,TMT有2標(biāo)(2-plex)、6標(biāo)(6-plex)和10標(biāo)(10-plex)等3種規(guī)格。iTRAQ/TMT標(biāo)記通量多樣,為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提供了更多的選擇性,有利于用戶根據(jù)自己的樣品數(shù)量,選擇合適的標(biāo)記方案。

iTRAQ/TMT技術(shù)的優(yōu)勢(shì)是能同時(shí)分析8-10組樣品,實(shí)驗(yàn)周期短。但其不足體現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)步驟多,系統(tǒng)誤差較大。

整體服務(wù)方案:

客戶只需提供樣本即可。我方負(fù)責(zé)完成后續(xù)所有實(shí)驗(yàn),包括:

蛋白質(zhì)提取與trypsin酶解。

酶解肽段iTRAQ/TMT標(biāo)記與混合。

混合肽段HPLC分離,收集餾分。

對(duì)每個(gè)餾分進(jìn)行LC-MS測(cè)試。

MS數(shù)據(jù)定性及定量分析,篩選差異表達(dá)的蛋白質(zhì)。

差異表達(dá)蛋白常規(guī)生物信息學(xué)分析。

我方該服務(wù)的優(yōu)勢(shì)體現(xiàn)在:(1)樣品通常分為15個(gè)餾分;(2)每個(gè)流程LC-MS測(cè)試時(shí)間為2h,共計(jì)測(cè)試15×2=30h。餾分和測(cè)試時(shí)間的增加,能顯著提高蛋白質(zhì)鑒定數(shù)目和蛋白質(zhì)定量的準(zhǔn)確度。

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