人CD163分子(CD163)檢測(cè)試劑盒可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標(biāo)記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。 ,
親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個(gè)分子由4個(gè)亞基組成,可以和4個(gè)生物素分子親密結(jié)合?,F(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉和素(strepavidin)。生物素(biotin)又稱維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。人CD163分子(CD163)檢測(cè)試劑盒用化學(xué)方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強(qiáng),親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)生物素分子的結(jié)合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELIS偶聯(lián)起來,就可大提高ELISA的敏感度。
質(zhì)量控制血清 質(zhì)控血清是已有靶值的血清,在每次的常規(guī)檢驗(yàn)中加入一份或數(shù)份,通過所得結(jié)果來了解本次檢驗(yàn)的情況。人CD163分子(CD163)檢測(cè)試劑盒質(zhì)控血清檢驗(yàn)的結(jié)果如能控制其誤差在一定范圍內(nèi),就說明該檢驗(yàn)沒有發(fā)生不允許的誤差。如果出現(xiàn)超過允許誤差范圍的異常結(jié)果,提示該檢驗(yàn)不合格,應(yīng)尋找原因,糾正后,重檢待測(cè)標(biāo)本。因此質(zhì)控血清在質(zhì)控工作中起重要作用。
質(zhì)控血清的使用 衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心制備的乙肝標(biāo)志物質(zhì)控血清,可以在-20℃保持半年定值不變。冰凍狀態(tài)融化使用時(shí),應(yīng)先混勻,未用完部分可在4℃保存5天。不宜反復(fù)冰融或自行分裝。開展某項(xiàng)檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清,一般按3-6個(gè)月用量準(zhǔn)備。自制的不定值質(zhì)控血清,在一批質(zhì)控血清將用完之前,需準(zhǔn)備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清要求性能穩(wěn)定,較長(zhǎng)期內(nèi)效價(jià)不變,其理化性質(zhì)應(yīng)與病人樣本相近,這樣才能有效地起到監(jiān)測(cè)作用。
ELISA原理:①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。人CD163分子(CD163)檢測(cè)試劑盒用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。
果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。
hzA591Hu 人抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Proliferating HZll Nuclear Antigen (PCNA)
hzA593Hu 人肌原纖蛋白1(FBN1)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Fibrillin 1 (FBN1)
hzA391Hu 人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Follistatin (FS)
hzA387Hu 人補(bǔ)體3a(C3a)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Complement Component 3a (C3a)
hzA388Hu 人補(bǔ)體成分5a(C5a)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Complement Component 5a (C5a)
hzB620Hu 人C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for C4 Binding Protein Alpha (C4BPa)
hzA884Hu 人二肽基肽酶Ⅳ(DPP4)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Dipeptidyl Peptidase IV (DPP4)
hzA811Hu 人血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Angiotensin I (AngI)
hzA798Hu 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a)
hzA824Hu 人B-淋巴細(xì)胞激活抗原B7-2(LAB7-2)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2 (LAB7-2)
hzA823Hu 人90kDa熱休克蛋白β1(HSP90β1)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Beta 1 (HSP90b1)
hzS134Hu 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Superoxide Dismutases (SOD)
hzA822Hu 人60kD熱休克蛋白(HSPD1)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Heat Shock 60kD Protein 1, Chaperonin (HSPD1)
hzA797Hu 人血管緊張素原(AGT)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Angiotensinogen (AGT)
hzA814Hu 人脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(HZTP)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Cholesteryl Ester Transfer Protein (HZTP)
hzA815Hu 人神經(jīng)型一氧化氮合酶()ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal ()
hzA816Hu 人α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP)
hzA817Hu 人結(jié)合珠蛋白(Hpt)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Haptoglobin (Hpt)
hzA068Hu 人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP)
hzA803Hu 人神經(jīng)介素B(NMB)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Neuromedin B (NMB)
hzA886Hu 人過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated ReHZptor Gamma (PPARg)
hzA820Hu 人凝血因子Ⅱ(F2)ELISA試劑盒價(jià)格 ELISA Kit for Coagulation Factor II (F2)
【預(yù)期用途】
僅供科研使用,不得用于臨床檢驗(yàn)。
需要但未提供的材料及耗材:
1、酶標(biāo)儀
2、精密移液器及一次性吸頭
3、蒸餾水
4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)
5、37℃水浴鍋或恒溫箱
6、500ml量筒
7、無粉一次性乳膠手套
【儲(chǔ)存條件及有效期】
1、2-8℃保存,切勿冷凍,有效期6個(gè)月。
2、開封使用后,包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中,密閉自封袋,并將全部試劑放回2-8℃冰箱。
3、開封后,按照建議的條件保存,校準(zhǔn)品、包被微孔板和hrp標(biāo)記抗體,有效期為14天,其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。
【適用儀器】
半自動(dòng)的酶標(biāo)儀,如thermo mk3,或者國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)儀。
【樣本要求】
樣本類型和采集
以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中,不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
1、細(xì)胞培養(yǎng)上清:4000rpm條件下離心20min,去除細(xì)胞顆粒和聚合物,上清液保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
2、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,4000rpm條件下離心20min,小心地分離出血清,保存在- 20℃以下,避免反復(fù)凍融。
3、血漿:肝素,edta,或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下,離心20分鐘取上清,血漿保存在-20℃以下,避免反復(fù)凍融。
樣本保存和穩(wěn)定性:
樣本在2-8℃條件下,可以儲(chǔ)存72h,或者在- 20℃儲(chǔ)存6個(gè)月。樣本收集后,不是一次檢測(cè)完,請(qǐng)按一次用量分裝凍存,避免反復(fù)凍融,使用時(shí)在室溫下解凍,確保樣品均勻充分解凍。
【檢驗(yàn)方法】
試劑準(zhǔn)備
1、使用前,所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫30min,確保充分復(fù)溫到室溫。
2、濃縮洗滌液:從冰箱取出的濃縮洗滌液,會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水,按1:20稀釋,即1份的濃縮洗滌液,添加19份的蒸餾水。
3、底物:底物液a和b,在使用前,按1:1體積充分混合,混合后15分鐘內(nèi)使用。
操作程序:
1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
3、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μl,樣本孔加待測(cè)樣本50μl,空白孔不加。
5、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μl。
6、用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
7、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置20s,甩去洗滌液,吸水紙上拍干。
8、如此重復(fù)4次(共洗板5次)。若使用自動(dòng)洗板機(jī),請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡20s的程序,可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
9、將底物a和b按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μl。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
10、所有孔加入終止液50μl,在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(od值)。
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