細(xì)胞名稱：BEL/FU-GFP人肝癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標(biāo)記 已通過STR鑒定

規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶

特點(diǎn)：細(xì)胞代數(shù)為2-3代

包裝：內(nèi)層無(wú)菌自封袋；防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書

細(xì)胞來(lái)源：ATCC

貨期：1-2周

運(yùn)輸方式：快遞運(yùn)輸

售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)傳真或E-mail致銷售人員，我們將盡快為您解決。 

客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；

一、 細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)?辦法。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作。

二、 鏡下觀察：

未超過80%匯合度時(shí)，將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；

超過80%匯合度時(shí)，按要求比例消化傳代。

三、消化方法

1、將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無(wú)菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀察，等細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)后，加培養(yǎng)基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)

蟾毒靈對(duì)人肝癌多藥耐藥BEL-7402/5-FU細(xì)胞增殖活性的影響

目的 研究蟾毒靈對(duì)人肝癌多藥耐藥BEL-7402/5-FU細(xì)胞增殖活性的影響.方法 用噻唑藍(lán)比色法觀察蟾毒靈及5-氟尿嘧啶、甲氨蝶呤、阿霉素、長(zhǎng)春新堿對(duì)BEL-7402親本及耐藥細(xì)胞的抑制作用;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)1.00、0.10、0.01 μmol/L蟾毒靈作用24 h 對(duì)細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期的影響.結(jié)果 BEL-7402/5-FU細(xì)胞對(duì)上述化療藥物均有不同程度的耐藥性.蟾毒靈對(duì)BEL-7402親本及耐藥細(xì)胞24、48 h 的半數(shù)抑制濃度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),可明顯抑制BEL-7402/5-FU細(xì)胞生長(zhǎng).不同濃度蟾毒靈作用24 h 后的細(xì)胞凋亡率及IC50比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均＜0.01),且細(xì)胞G0/G1期降低,G2/M期升高,呈劑量依賴性(P＜0.01).結(jié)論 蟾毒靈對(duì)人肝癌多藥耐藥BEL-7402/5-FU細(xì)胞無(wú)交叉耐藥性,有增殖抑制作用,且呈時(shí)間、濃度依賴,其作用可能通過阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的.

　　購(gòu)買上海琛藝細(xì)胞BEL/FU-GFP人肝癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標(biāo)記 已通過STR鑒定注意事項(xiàng)發(fā)布

　　一、客戶收到細(xì)胞先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后（看細(xì)胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議受收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞100X，200X各一張），排除細(xì)胞本身污染的情況；

　　收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。

　　二、如為貼壁細(xì)胞，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度：

　　1.  未超過80%匯合度時(shí)，用75%酒精（建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水，噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；然后打開蓋子，先用槍頭把培養(yǎng)基吸出10ml左右，放在離心管里，然后瓶口過火（嚴(yán)禁直接傾倒），這樣可以保證不污染，再用10ml的移液管，將剩余的培液全部吸出，放于離心管中，培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時(shí)間根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況調(diào)整）之后，傳代或者凍存。

　　2. 超過80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

　　1) 棄去培養(yǎng)液，用3ml PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次；

　　2) 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM  EDTA）于T25培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)；

　　3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中，按要求分瓶。

　　三、如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

　　注意：換液時(shí)一半用我們的培養(yǎng)基，一半用你們的，以免細(xì)胞不適應(yīng)而造成生長(zhǎng)不好。

　　四、細(xì)胞出現(xiàn)問題，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么？

　?。?）細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

　　（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

　　（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

　　（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

　?。?）視具體情況而定。

　　五、細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？

　　（1）客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

　?。?）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

　?。?）細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

　?。?）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

　?。?）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

　　（6）視具體情況而定。