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用于分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測試的材料, 應(yīng)該是純度高、穩(wěn)定性好的物質(zhì)。這些物質(zhì)中較主要的是鉻酸鉀( K2 CrO4 , 一般在堿性溶液中)、重鉻酸鉀( K2 Cr2 O7 , 一般在酸性溶液中) 、硝酸鉀、中性濾光片等。在堿性溶液中的鉻酸鉀是一種好材料, 但是因?yàn)楹袎A性, 不能儲(chǔ)藏在普通玻璃容器中, 而需要儲(chǔ)藏在石英器皿中, 硝酸鉀本身不大穩(wěn)定。這些都限制了它們的使用。因此, 建議選擇易于純化又溶于酸性介質(zhì)中的物質(zhì), 并且它們的稀溶液也是很穩(wěn)定的。因此, 重鉻酸鉀的0. 005mol/ L H2 SO4 溶液經(jīng)常被使用。許多科學(xué)家認(rèn)為, 用紫外濾光片來測試分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度, 具有很大的優(yōu)點(diǎn)。因?yàn)樗鼈兊姆€(wěn)定性更好, 又便于攜帶, 還有許多優(yōu)點(diǎn)將在后面討論。
分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確度測試方法, 目前國內(nèi)外各生產(chǎn)廠家作法不一, 其主要原因是各國的國家標(biāo)準(zhǔn)不同; 如美國國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定: “選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)參比材料, 在規(guī)定的波長處, 連續(xù)測10 個(gè)吸光度或透射比讀數(shù), 取10個(gè)讀數(shù)的平均值, 實(shí)際吸光度或透射比與觀測值的平均值之差, 即為光度準(zhǔn)確度”。美國國家標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定了計(jì)算光度準(zhǔn)確度的標(biāo)準(zhǔn)偏差S 的方法; 規(guī)定指出吸光度準(zhǔn)確度用AA 表示, 則有式( 4-10) 、式( 4-11) 中, S 為標(biāo)準(zhǔn)偏差; Ai或Ti為每次測量時(shí)吸光度或透射比的讀數(shù)值; Aa或Ta為吸光度或透射比的平均值; n為測量次數(shù)( 一般取5～7 次)。
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