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HCT9/FU-GFP人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標(biāo)記 培養(yǎng)方法

來(lái)源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2020年03月03日 10:38  

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司經(jīng)過(guò)數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)為一體的專(zhuān)業(yè)化生物工程公司。公司新引進(jìn)細(xì)胞上千株,其中人的已通過(guò)STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購(gòu)。。。。。。

產(chǎn)品名稱(chēng):HCT9/FU-GFP人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標(biāo)記 培養(yǎng)方法

包裝:內(nèi)層無(wú)菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說(shuō)明書(shū)

細(xì)胞來(lái)源:ATCC、sciencell、ICLC

貨期:1-2周

運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸

售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)通知銷(xiāo)售人員,我們將盡快為您解決!

?Hepa 1-6細(xì)胞 Hepa 1-6小鼠肝癌細(xì)胞

?三、細(xì)胞生長(zhǎng)條件:

 

一、組成:

組份 數(shù)目

細(xì)胞 1 T-25瓶

細(xì)胞說(shuō)明書(shū) 一份

二、細(xì)胞簡(jiǎn)介:

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

 

細(xì)胞來(lái)源: 從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn)

培養(yǎng)條件: 培養(yǎng)基:1640 +10%FBS(推薦德國(guó)BI 04-002-1A

優(yōu)等胎牛血清)

氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37℃

培養(yǎng): 一、貼壁細(xì)胞

1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時(shí)的緩沖,.然后置于無(wú)菌操作臺(tái),打開(kāi)瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代;

2.待細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)瓶底面積80%-90%,需要對(duì)其進(jìn)行傳代,di一次傳代比例為1:2。

3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(di一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見(jiàn)細(xì)胞脫落為*消化時(shí)間,記錄*消化時(shí)間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行傳代。

 

二、懸浮細(xì)胞

1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒,然后置于無(wú)菌操作臺(tái),打開(kāi)瓶口,輕輕吹打后,將其中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;

2.將離心好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基,然后將其置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養(yǎng)基);

3.顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)目比較多時(shí),對(duì)其進(jìn)行傳代,di一次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養(yǎng))。

HCT9/FU-GFP人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標(biāo)記 培養(yǎng)方法

細(xì)胞總數(shù): 1~3*106

傳代周期: 2-3天

傳代比例: 1:2~1:4

換液頻率: 2-3天

凍存液: 90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事項(xiàng):

1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請(qǐng)換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)

3 對(duì)于貼壁細(xì)胞,若大部分細(xì)胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁,表明細(xì)胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉;若大部分細(xì)胞仍然不貼壁,將漂浮的細(xì)胞離心收集,用臺(tái)盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力,并與本公司銷(xiāo)售人員及時(shí)聯(lián)系。

4 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問(wèn)題請(qǐng)于72h內(nèi)與本公司銷(xiāo)售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問(wèn)題,超過(guò)時(shí)間我段,本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好,不免費(fèi)對(duì)后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問(wèn)題進(jìn)行售后。

NIH-3T3-LUC 小鼠成纖維細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

NIH-3T3-GFP 小鼠成纖維細(xì)胞-綠色標(biāo)記

293-LUC(HEK293-LUC) 人胚腎細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

293-GFP(HEK293-GFP) 人胚腎細(xì)胞-綠色標(biāo)記

4T1-LUC 小鼠乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

4T1-GFP 小鼠乳腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

769-P-LUC 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

769-P-GFP 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

786-O-LUC 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

786-O-GFP 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

95-D-LUC 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

95-D-GFP 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A172-LUC 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A172-GFP 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A2780/Taxol-LUC 人卵巢癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

A2781/Taxol-GFP 人卵巢癌紫杉醇耐藥株-綠色標(biāo)記

A2780-LUC 人卵巢癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A2780-GFP 人卵巢癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A375-LUC 人惡性黑色素瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A375-GFP 人惡性黑色素瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A-431-LUC 人表皮癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A-431-GFP 人表皮癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A549/Taxol-LUC 人肺癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

A549/Taxol-GFP 人肺癌紫杉醇耐藥株-綠色標(biāo)記

A549/DDP-LUC 人肺腺癌順鉑耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

A549/DDP-GFP 人肺腺癌順鉑耐藥株-綠色標(biāo)記

A549-LUC 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A549-GFP 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

Acc-2-LUC 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

Acc-2-GFP 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

ACHN-LUC 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

ACHN-GFP 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

AsPc-1-LUC 人轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

AsPc-1-GFP 人轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

B16-LUC 小鼠黑色素瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

B16-GFP 小鼠黑色素瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記

B16F10-LUC 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

B16F10-GFP 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞-綠色標(biāo)記

BEL/FU-LUC 人肝癌氟尿嘧啶耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

BEL/FU-GFP 人肝癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標(biāo)記

Bel-7402-LUC 人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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Bel-7404-LUC 人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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BGC-803-LUC 人胃癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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BGC-823-LUC 人低分化前胃癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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BHK-21-LUC 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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BIU-87/Adr-LUC 人膀胱癌阿霉素耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的同學(xué)看過(guò)來(lái)。

選擇上海琛藝生物細(xì)胞有3個(gè)理由:

1、細(xì)胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細(xì)胞之一;

2、物流迅速,復(fù)蘇好后發(fā)貨,次日就能到;

3、使用我司推薦的進(jìn)口品牌血清進(jìn)行培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),效果更佳。

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