HCT8/Taxol-LUC人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記培養(yǎng)方法-NTCC保藏中心

【Organism物種來(lái)源】Animal

【Tissue組織來(lái)源】

【Cell Type細(xì)胞類型】

【Product Format產(chǎn)品狀態(tài)】 frozen/live culture

【Morphology細(xì)胞形態(tài)】

【Culture Properties細(xì)胞特性】

【Biosafety Level生物安全級(jí)別】 1/2

Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.

【Disease細(xì)胞源疾病】

【Age年齡】

【Gender性別】 Male/Female

【Storage Conditions保存條件】 liquid nitrogen vapor phase

【Karyotype染色體組型】

【Images細(xì)胞圖片】 Cell Micrograph

【Derivation衍生細(xì)胞】 ­

【Clinical Data臨床數(shù)據(jù)】

【Comments其他描述】

【Complete Growth Medium*培養(yǎng)基】 The base medium for this cell line is DMEM/RPMI-1640 Medium. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum to a final concentration of 10%.

【Subculturing傳代方法】

Volumes are given for a 75 cm2 flask. Increase or decrease the amount of dissociation medium needed proportionally for culture vessels of other sizes.

Remove and discard culture medium.

Briefly rinse the cell layer with 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA solution to remove all traces of serum that contains trypsin inhibitor.

Add 2.0 to 3.0 mL of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes).

Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting for the cells to detach. Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to facilitate dispersal.

Add 6.0 to 8.0 mL of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.

Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels.

Incubate cultures at 37°C.

Subc*tion Ratio: A subc*tion ratio of 1:2 to 1:6 is recommended

Medium Renewal: 2 to 3 times per week

【Cryopreservation凍存條件】

【Freeze Medium凍存培養(yǎng)基】Complete growth medium supplemented with 5% (v/v) DMSO

【Storage Temperature保存溫度】 Liquid nitrogen vapor phase

【Culture Conditions培養(yǎng)條件】

【Atmosphere培養(yǎng)環(huán)境】 Air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

【Temperature培養(yǎng)溫度】 37°C

【STR Profile圖譜】

【Population Doubling Time倍增殖時(shí)間】

【References參考文獻(xiàn)】

HCT8/Taxol-LUC人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記培養(yǎng)方法操作步驟：

請(qǐng)收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(建議在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

（二） (二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1.棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。

如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。

注：1、觀察細(xì)胞建議在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否 則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們。

NIH-3T3-LUC 小鼠成纖維細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

NIH-3T3-GFP 小鼠成纖維細(xì)胞-綠色標(biāo)記

293-LUC（HEK293-LUC) 人胚腎細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

293-GFP(HEK293-GFP) 人胚腎細(xì)胞-綠色標(biāo)記

4T1-LUC 小鼠乳腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

4T1-GFP 小鼠乳腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

769-P-LUC 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

769-P-GFP 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

786-O-LUC 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

786-O-GFP 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

95-D-LUC 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

95-D-GFP 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A172-LUC 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A172-GFP 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A2780/Taxol-LUC 人卵巢癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

A2781/Taxol-GFP 人卵巢癌紫杉醇耐藥株-綠色標(biāo)記

A2780-LUC 人卵巢癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A2780-GFP 人卵巢癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A375-LUC 人惡性黑色素瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A375-GFP 人惡性黑色素瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A-431-LUC 人表皮癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A-431-GFP 人表皮癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

A549/Taxol-LUC 人肺癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

A549/Taxol-GFP 人肺癌紫杉醇耐藥株-綠色標(biāo)記

A549/DDP-LUC 人肺腺癌順鉑耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

A549/DDP-GFP 人肺腺癌順鉑耐藥株-綠色標(biāo)記

A549-LUC 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

A549-GFP 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

Acc-2-LUC 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

Acc-2-GFP 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

ACHN-LUC 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

ACHN-GFP 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

AsPc-1-LUC 人轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

AsPc-1-GFP 人轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

B16-LUC 小鼠黑色素瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

B16-GFP 小鼠黑色素瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記

B16F10-LUC 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

B16F10-GFP 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞-綠色標(biāo)記

BEL/FU-LUC 人肝癌氟尿嘧啶耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

BEL/FU-GFP 人肝癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標(biāo)記

Bel-7402-LUC 人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

Bel-7402-GFP 人肝癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

Bel-7404-LUC 人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

Bel-7404-GFP 人肝癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

BGC-803-LUC 人胃癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

BGC-803-GFP 人胃癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

BGC-823-LUC 人低分化前胃癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

BGC-823-GFP 人低分化前胃癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

BHK-21-LUC 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

BHK-21-GFP 敘利亞倉(cāng)鼠腎細(xì)胞-綠色標(biāo)記

BIU-87/Adr-LUC 人膀胱癌阿霉素耐藥株-熒光素酶標(biāo)記