在ELISA試劑盒操作中,咱們都認為ELISA試驗的原理好像很簡單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗刷和關閉。然而,即使是平淡無奇的洗刷和關閉,假如做得不太好,也有或許毀了整個試驗。在試驗結束時,咱們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于成果的信噪比。布景噪音會影響您對成果的判斷。今天我司怎么教你降低ELISA試劑盒操作的布景噪音。
一、洗刷很重要:洗刷步驟看似很無聊,其實很重要,因為假如未結合的資料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,那么它會添加布景噪音。如有必要,可添加洗刷液中的鹽濃度,這會阻撓非特異結合反應。假如布景過高,而您置疑洗刷不夠時,可以測驗添加洗刷次數(shù)。
二、關閉更關鍵:關閉液的作用是讓不相關的蛋白占有微孔板中潛在的結合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結合的機會。您當然也期望抗體只與目的蛋白結合吧。假如您的布景過高,置疑關閉不充分,那么您可以測驗運用更高濃度的關閉液,或適當延伸關閉時間。
三、抗體濃度須優(yōu)化:咱們通常會follow師兄師姐留下來的操作步驟,但是假如試劑稍有不同,則或許需要優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體結合會添加布景。為了避免這一點,切勿運用過多的一抗或二抗。
四、檢測試劑要適量:另一點也很清楚明了:切勿運用過多的檢測試劑。假如濃度過高,或者未正確稀釋,則會導致高布景。也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應加入終止液。
假如您的ELISA試劑盒操作中不幸地遇到了高布景,那么也無需太憂慮,順次檢查ELISA體系中的組分,并排除或許存在的問題。盡心優(yōu)化,相信很快就會有美麗的成果。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。