（1）材料準(zhǔn)備
牛型提純結(jié)核菌素、酒精棉、卡尺、1～2．5ml注射器、針頭、工作服、帽、口罩、膠鞋、記錄表、線手套等。如果凍干菌素，還需準(zhǔn)備稀釋用注射用水或滅菌的生理鹽水和帶膠塞的滅菌小瓶。

（2）操作方法
①注射部位及術(shù)前處理。將牛只編號后在頸側(cè)中部上1／3處剪毛（或提前一天剃毛），3個月以內(nèi)的犢牛也可在肩胛部進行，直徑約lOcm，用卡尺測量術(shù)部中央皮皺厚度，做好記錄。如術(shù)部有變化時，應(yīng)另選部位或在對側(cè)進行。

②注射劑量。不論大小牛只，一律皮內(nèi)注射1萬單位。即將牛型提純結(jié)核菌素稀釋成每毫升含10萬單位后，皮內(nèi)注射0．1ml。如用2．5ml注射器，應(yīng)再加等量注射用水皮內(nèi)注射0．2ml。凍干菌素稀釋后應(yīng)當(dāng)天用完。

③注射方法。先以75％酒精消毒術(shù)部，然后皮內(nèi)注入定量的牛型提純結(jié)核菌素，注射后局部應(yīng)出現(xiàn)小泡，如注射有疑問時，應(yīng)另選15cra以外的部位或?qū)?cè)重作。

④注射次數(shù)和觀察反應(yīng)。皮內(nèi)注射后經(jīng)72h判定，仔細(xì)觀察局部有無熱痛、腫脹等炎性反應(yīng)，并以卡尺測量皮皺厚度，作好詳細(xì)記錄。對疑似反應(yīng)牛應(yīng)即在另一側(cè)以同一批菌素同一劑量進行第二回皮內(nèi)注射，再經(jīng)72h后觀察反應(yīng)。如有可能，對陰性反應(yīng)和疑似反應(yīng)牛，于注射后96h和120h再分別觀察一次，以防個別牛出現(xiàn)較晚的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。

⑤結(jié)果判定。
陽性反應(yīng) 局部有明顯的炎性反應(yīng)。皮厚差等于或大于4mm以上者，其記錄符號為（+）。對進出口牛的檢疫，凡皮厚差大于2mm者，均判為陽性。
疑似反應(yīng) 局部炎性反應(yīng)不明顯，皮厚差在2，1～3．9mm間，其記錄符號為（±）。
陰性反應(yīng) 無炎性反應(yīng)。皮厚差在2mm以下，其記錄符號為（一）。

⑥凡判定為疑似反應(yīng)的牛只，于*次檢疫30天后進行復(fù)檢，其結(jié)果仍為可疑反應(yīng)時，經(jīng)30～45天后再復(fù)檢，如仍為疑似反應(yīng)，應(yīng)判為陽性。