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什么是實(shí)時(shí)定量pcr儀？這就告訴你
做定量PCR的目的是為了了解起始模板數(shù)的量,這個(gè)一下寫不清楚,你看一個(gè)說明書看得懂.而反轉(zhuǎn)錄PCR就是把mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,簡(jiǎn)寫也是RT-PCR.不過和上面的不同!這個(gè)RT是reverse transcript的縮寫!其實(shí)啊,對(duì)于做表達(dá)量的實(shí)驗(yàn)而言,反轉(zhuǎn)錄PCR是熒光定量PCR的di一步,很多人是這么來描述的:RT-qPCR.這個(gè)RT就是反轉(zhuǎn)錄,這個(gè)q是量.
在普通PCR儀設(shè)計(jì)基礎(chǔ)上增加熒光信號(hào)激發(fā)和采集系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)，形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴(kuò)增原理和普通PCR擴(kuò)增原理相同，在PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物是利用同位素、熒光素等進(jìn)行標(biāo)記，實(shí)時(shí)定量pcr儀使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合擴(kuò)增。擴(kuò)增的結(jié)果通過熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)連接輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)，得出量化的實(shí)時(shí)結(jié)果輸出。
熒光定量PCR儀有單通道，雙通道和多通道之分。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時(shí)候，選用單通道；有多種熒光標(biāo)記的時(shí)候使用多通道。單通道也可以檢測(cè)多熒光的標(biāo)記和目的基因表達(dá)產(chǎn)物，因?yàn)橐淮沃荒軝z測(cè)一種目的基因的擴(kuò)增量，需多次擴(kuò)增才能檢測(cè)完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR，實(shí)現(xiàn)一次檢測(cè)多種目的基因的功能。
實(shí)時(shí)定量pcr儀要應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)檢測(cè)、生物醫(yī)藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。
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