人嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作步驟的詳細(xì)資料：

英文名稱:Human eosinophil cationic protein (ECP) ELISA kit

貨號(hào)：KS15148

規(guī)格：96T/48T

使用范圍：僅限科研范圍內(nèi)使用

各種種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊… 
標(biāo)本齊全：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等… 
保存條件：2-8℃ 
人嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒提供ELISA代做實(shí)驗(yàn)

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自備材料 
1． 蒸餾水。 
2． 加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 
3． 振蕩器及磁力攪拌器等。 
安全性 
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。 
2． 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。 
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。 
人嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng) 
1． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。 
2． 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。 

3． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。 
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。 
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品 
6． 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。 
7． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。 
8． 加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。 
9． 按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。 
人嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作步驟

樣品收集、處理及保存方法 
1、 血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆 
3、 細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。 
4、 保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 
人嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒操作步驟 
1． 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。 
2． 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。 
3． 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。 
4． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。 
5． 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。 
6． 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。 
7． 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。 
8． 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。 
9． 在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。