高效液相色譜柱分離效能高。可選擇固定相和流動(dòng)相以達(dá)到*分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
高效液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí), 經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出, 通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
高效液相色譜柱需要怎么清洗?
一般反相色譜,經(jīng)常會(huì)用到緩沖鹽。而百鹽對(duì)于色譜柱傷害比較大。如果鹽堵在色譜柱里面那柱子就廢了。所以需要把它沖掉。*是每次都沖掉。
如果你的柱子流動(dòng)相里面沒(méi)有鹽,那就沒(méi)必要沖洗了。
沖洗方法:反相柱子*保存度在純甲醇或者純乙腈里面,但是鹽不溶于純有機(jī)相。所以中間過(guò)渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什么,要看你的流動(dòng)相。
比如,我用的是磷酸鹽緩沖液-乙腈(70:30)的流動(dòng)相,那么沖洗的時(shí)候*選用10%-15%乙腈水,沖洗1.0ml/min,至少30min,*40min。
如果第二天接著使用的話可以不*純甲回醇或者純乙腈封存了。如果第二天不用,*用純的有機(jī)相封上柱子,同樣是1.0ml/min流速?zèng)_洗30min。
另,也不是說(shuō)不清洗就會(huì)壞。我們研發(fā)有的時(shí)候?yàn)榱粟s項(xiàng)目,來(lái)不及沖洗色譜柱。柱子不會(huì)怎么樣。就是壽命會(huì)短一點(diǎn)而已。
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