單克隆抗體是用于治療各種疾病的一類重要的生物分子。生物仿制藥是創(chuàng)新藥物分 子的復(fù)制品，需要詳細(xì)表征其關(guān)鍵質(zhì)量屬性 (CQA)，例如聚集體和電荷異構(gòu)體。與 創(chuàng)新藥物相比，這些屬性必須處于一定范圍內(nèi)才可獲得監(jiān)管機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)。本研究采用 基于 Agilent 1260 Infinity II 生物惰性液相色譜和 Agilent AdvancedBio 色譜柱的兩種 分析工作流程，對不同制造商生產(chǎn)的兩種利妥昔單抗生物仿制藥與創(chuàng)新藥物的聚集 體和電荷異構(gòu)體圖譜進(jìn)行了比較。結(jié)果顯示了創(chuàng)新藥物與生物仿制藥在聚集體和電 荷異構(gòu)體圖譜方面的相似性或差異性。生物仿制藥 1 與創(chuàng)新藥物在聚集體和電荷異 構(gòu)體方面的相似性高于生物仿制藥 2。方法表現(xiàn)出優(yōu)異的日內(nèi)和日間重現(xiàn)性。Agilent OpenLab CDS 軟件的 Peak Explorer 功能使數(shù)據(jù)審查一目了然。本研究是一系列利妥 昔單抗生物相似性研究的一部分。

單克隆抗體 (mAb) 藥物是制藥市場上 增長快的生物治療藥物之一。大多數(shù) mAb 用于治療癌癥[1]。mAb 創(chuàng)新藥物在 發(fā)現(xiàn)、開發(fā)、生產(chǎn)和臨床試驗(yàn)方面投資巨 大，這也導(dǎo)致患者接受創(chuàng)新藥物治療的費(fèi) 用通常很高。因此，創(chuàng)新藥物的廉價(jià)仿 制藥（稱為“生物仿制藥”）的需求量很 大。第yi款生物仿制藥于 2006 年獲準(zhǔn)進(jìn) 入歐洲市場，進(jìn)入美國市場則是在九年 后，此時(shí)美國已于 2010 年 3 月實(shí)施《平 價(jià)醫(yī)療法案》。由于創(chuàng)新藥物分子到期，生物仿制藥的開發(fā)越來越受關(guān)注。 為了使生物仿制藥獲得監(jiān)管機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)，制 造商需要證明其生物制劑與對照品之間在 安全性、純度和效價(jià)方面不存在具有臨床 意義的差異[2]。在這一過程中，關(guān)鍵在于 開展廣泛的比較分析研究，以了解創(chuàng)

聚集體、截短體和其他修飾形式（脫酰 胺、異構(gòu)化等）是在生產(chǎn)過程或儲(chǔ)存過程 中產(chǎn)生的與產(chǎn)品相關(guān)的雜質(zhì)。藥物中存 在這些雜質(zhì)時(shí)，會(huì)影響藥物的穩(wěn)定性、 活性和有效性。因此，它們通常被視為 CQA，并且在整個(gè)生產(chǎn)過程中受到密切監(jiān) 控和檢測[3]。

本應(yīng)用簡報(bào)使用兩種分析工作流程展示了 兩種利妥昔單抗生物仿制藥與其創(chuàng)新藥物 之間在聚集體和異構(gòu)體方面的比較結(jié)果。 *，利妥昔單抗是一種生物治療藥 物，用于治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、狼瘡、血 管炎和皮肌炎。兩種生物仿制藥來自兩家 位于不同地理位置的制造商。兩種工作 流程均基于配備 AdvancedBio 色譜柱和 OpenLab CDS 的 1260 Infinity II 生物惰性 液相色譜系統(tǒng)。在弱陽離子交換 (WCX) 色譜柱上分離電荷異構(gòu)體，在體積排阻 (SEC) 色譜柱上分離聚集體。圖 1 詳細(xì)展 示了兩種工作流程。日內(nèi)結(jié)果和日間結(jié)果 具有良好的重現(xiàn)性，確保了工作流程的可 靠性，并清晰地展示了創(chuàng)新藥物與生物仿 制藥之間的相似性和差異性。 

實(shí)驗(yàn)部分：儀器 該系統(tǒng)包括以下模塊： • Agilent 1260 Infinity II 液相色譜儀生物惰性泵 (G5654A) • Agilent 1260 Infinity II 生物惰性 Multisampler (G5668A)，配備樣品 冷卻裝置 • Agilent 1260 Infinity II 高容量柱溫箱 (G7116A)，配備生物惰性熱交換器 • Agilent 1260 Infinity II 二極管陣列檢 測器 WR (G7115A)，配備生物惰性 流通池 • Agilent 1260 Infinity II 生物惰性多檢 測器套裝 (MDS) (G7805A)，配備雙 角度靜態(tài)和動(dòng)態(tài)光散射 (DLS) 檢測器 (G7809A)