BIU-87（人膀胱癌細胞）產(chǎn)品概述：

細胞名稱：BIU-87/DDP人膀胱癌順鉑耐藥株細胞 培養(yǎng)步驟

種屬：人

年齡（性別）

組織來源

生長特性

貼壁

細胞形態(tài)

上皮細胞樣

背景描述

BIU-87細胞是由俞莉章等建系于1989年；BIU-87細胞來源于人膀胱乳頭狀移行上皮癌，通常采用5×10^8細胞、0.2ml的接種體積接種至裸鼠皮下；BIU-87細胞呈進行性腫瘤生長，腫瘤結(jié)節(jié)病檢與原標本癌組織相似。BIU-87細胞22代群體倍增時間為34小時；BIU-87細胞能在軟瓊脂上生長，克隆形成率23%。BIU-87細胞對ConA、WGA、PSL均有凝集反應(yīng)。

生長培養(yǎng)基

RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

BIU-87（人膀胱癌細胞）操作說明：

1)對于常溫運輸?shù)募毎?，收到細胞后，檢查是否有運輸問題，即細胞培養(yǎng)瓶或管是否破損，細胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題，請75%酒精消毒后，保留封口膜，放入細胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù)：溫度，濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后，細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，即可開始后續(xù)操作。選用正確的細胞培養(yǎng)體系，A2780(人卵巢癌細胞)嚴格按照說明書的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。條件允許，培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細胞拍照記錄，通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。

2)對于干冰運輸?shù)募毎?，請取出冷凍管后，須立即放?7C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。然后將其復蘇培養(yǎng)，次日更換培養(yǎng)液。

BIU-87/DDP人膀胱癌順鉑耐藥株細胞 培養(yǎng)步驟

注意事項：

1)細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以離心去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

2)對于生長緩慢的貼壁細胞：可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度，或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度。

3)對于生長不均的貼壁細胞：在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時（即某一區(qū)域細胞已重疊生長，而旁邊則為一塊空白），此時可將細胞進行消化，重新打散，貼壁，加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 

BIU-87（人膀胱癌細胞）下面介紹幾種細胞培養(yǎng)過程中常見的污染：

一)桿菌污染：培養(yǎng)基中加入抗生素可以減少此種污染，但也不是的。

二)支原體污染：傳說中的黑焦蟲，長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數(shù)情況下是培養(yǎng)用血清。

三)念珠菌污染：似乎無處不在，而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細胞上，高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。

四)霉菌污染、比較常見的一種污染，常常來源于污染的空氣、水和器械。 

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