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T24-LUC人膀胱移行細(xì)胞癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 培養(yǎng)步驟

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2020年05月06日 15:30  

感恩回饋,價格實惠,物美價廉,量大從優(yōu),部分試劑買一送一。。。。。。

 

上海琛藝實業(yè)有限公司提供ATCC原代細(xì)胞,ATCC菌株代購,同時上海琛藝新增細(xì)胞庫,具有自己的研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)庫,上千株細(xì)胞具有STR鑒定,開春大放送,*,同時還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。

T24-LUC人膀胱移行細(xì)胞癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定

 

【細(xì)胞傳代】:1:3 傳代

 

【細(xì)胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

 

【細(xì)胞檢測】:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

 

【細(xì)胞凍存】:液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)

 

【細(xì)胞運輸】:干冰運輸(1 Vial)或活細(xì)胞運輸(T-25 flasks)

 

詳細(xì)背景: 這株細(xì)胞的細(xì)胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動蛋白,在細(xì)胞質(zhì)中有豐富的平行微絲。有報道稱在1uM血管緊張素II存在下,它們會收縮。細(xì)胞在軟瓊脂中形成克隆,SV40大T抗原陽性。

 

細(xì)胞來源: 細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系

 

"購買細(xì)胞注意事項:

 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

 

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。

 

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,OSKMZ-1小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞| OSKMZ-1動物

 

顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

 

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。

 

規(guī)格: 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)

 

細(xì)胞規(guī)格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml

 

產(chǎn)品優(yōu)勢

 

小鼠胚胎干細(xì)胞分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種,相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細(xì)胞,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的道也是*主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細(xì)胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的20%,小膠質(zhì)細(xì)胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng),斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和神經(jīng)病理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細(xì)胞會引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源,如腫瘤壞死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能:①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中;②當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時,或在大腦發(fā)育的過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時,神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞;③膠質(zhì)細(xì)胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達CD-4陽性T細(xì)胞時表達抗原,能進行Fc介導(dǎo)的巨噬作用,并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。

 

本公司生產(chǎn)的小鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶;細(xì)胞經(jīng)PCK/TG免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

T24-LUC人膀胱移行細(xì)胞癌熒光素酶標(biāo)記細(xì)胞 培養(yǎng)步驟

參數(shù)規(guī)格

 

1) 來源:甲狀腺

 

 

 

2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣

 

 

 

3) 含量:>1x106 個/mL

 

 

 

4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性

 

 

 

5) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

產(chǎn)品相冊

 

 

 

可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:

 

產(chǎn)品名稱: T24-LUC

細(xì)胞污染: HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。

細(xì)胞傳代步驟: 如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟: 將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞凍存步驟: 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml*培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

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