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CTAB抽提液中文說(shuō)明書

來(lái)源:上海銘博生物科技有限公司   2020年05月08日 11:12  

CTAB抽提液

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
從植物組織中制備基因組DNA較常采用的方法有氯化離心法、CTAB抽提法等,


CTAB抽提法是經(jīng)典的植物DNA提取法,可以用于多種不同類型植物樣品DNA的

 

提取,獲得的量很高,但是純度一般,但是足夠用于大多數(shù)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

CTAB抽提液的有效成分為CTAB(十六烷基三乙基溴化銨),臨用前加入

2-ME,使其更有效,更穩(wěn)定。


產(chǎn)品組成:

編號(hào)
名稱
NE0011
500ml
Storage
試劑(A):CTAB抽提液
500ml
RT
試劑(B):2-ME
10ml
RT避光
使用說(shuō)明書


自備材料:
1、液氮\研缽或勻漿器
2、離心管
3、恒溫箱或水浴鍋
4、離心機(jī)
5、*/異戊醇(24:1)
6、75%乙醇

操作步驟(僅供參考):
1、取5ml適量的CTAB抽提液,按CTAB抽提液:2-ME=50:1的比例混勻,置于15ml或其他規(guī)格的離心管中,60℃預(yù)熱;如有必要可加入1~5μg/ml的RNaseA,以便去除殘余的RNA。

2、稱取1~1.5g或適量新鮮植物組織或葉片,用預(yù)冷的液氮或干冰冷卻研缽或勻漿器,將新鮮植物組織或葉片粉碎成細(xì)粉末,將冷凍的組織轉(zhuǎn)移至離心管中。

3、向粉碎后的組織中按4~5ml/g加入預(yù)熱的CTAB抽提液,充分混勻,65℃溫育15~60min,并不時(shí)混勻。

4、加入等體積*/異戊醇(24:1),顛倒充分混勻,8000g離心5~10min,回收上層水相(即上清液,該上清液中含有所需DNA)。

5、轉(zhuǎn)移上清液至新的離心管中,加入1/2~2/3體積預(yù)冷的異丙醇,輕輕混勻,室溫靜置使核酸沉至管底;如果觀察不到沉淀,可在室溫下靜置數(shù)小時(shí)至過(guò)夜。

6、2000g離心2min,輕輕棄上清液。


7、在松散的DNA沉淀物上加入75%乙醇,室溫靜置20min,4000g離心10min,輕輕棄上清液。

8、自然干燥DNA,加入適量去離子水或TE緩沖液;如有必要可加入1~5μg/ml的RNAseA,以便去除殘余的RNA,-20℃保存。

注意事項(xiàng):
1、如果每次的使用量很小,可以適當(dāng)分裝后再使用。
2、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:24個(gè)月有效。

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