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動(dòng)物的免疫過(guò)程是在集體多種器官和細(xì)胞的參與下完成的，所以即便是用同一種抗原免疫，在同一個(gè)免疫周期中，受試動(dòng)物針對(duì)同一抗原產(chǎn)生的抗體也存在極大的差別。以人和小鼠為例，機(jī)體內(nèi)存在有IgG, IgA, IgM, IgE 和IgD五種亞型的抗體，其中IgG依二硫鍵的位置不同又分為四個(gè)輕微差異的亞型，稱(chēng)為同型。在一些免疫學(xué)試驗(yàn)中，為了觀察受試動(dòng)物免疫反應(yīng)所處的階段，常常需要以受試動(dòng)物產(chǎn)生的主體抗體亞型為線索，對(duì)特定亞型的抗體實(shí)現(xiàn)捕獲或標(biāo)記，同時(shí)無(wú)需專(zhuān)一性的識(shí)別針對(duì)特定抗原的抗體，這就是所謂的抗專(zhuān)一亞型抗體，它是抗體亞型鑒定的基礎(chǔ)材料。
服務(wù)組合
服務(wù)項(xiàng)目 (Service Items) | 周期（月） Time(months) | 客戶提供 (Start point) | ||||||||
純化的單一亞型抗體 purified single isotype antibodies | 混合抗體（血清） mixed antibodies (serum) | 原核表達(dá)從頭制備 Prokaryotic proteins synthesis de novo | 真核表達(dá)從頭制備 Eukaryotic proteins synthesis de novo | |||||||
抗原制備 antigens preparation | cDNA合成 cDNA synthesis | 1~2 | 另議，時(shí)間與價(jià)格均不包含在以下信息中 | |||||||
載體構(gòu)建 Vector construction | √ | √ | √ | √ | ||||||
分離特定亞型并純化 Isolating single isotype antibodies and purification | √ | |||||||||
蛋白表達(dá)與純化 Protein expression & purification | √ | √ | ||||||||
酶切回收 Enzyme treatment and recovering | √ | √ | √ | √ | ||||||
免疫階段 Immunization | 免疫5只小鼠或兩只兔子 Immunized 5 mice or 2 rabbits | 1.5 | √ | √ | √ | √ | ||||
ELISA效價(jià)檢查 ELISA titer check | √ | √ | √ | √ | ||||||
細(xì)胞融合與篩選 Fusion & Screening | 1.5 | √ | √ | √ | √ | |||||
同家族免疫球蛋白正向復(fù)篩（亞克隆階段） Same isotype immunoglobulin positive screening (subcloning) | √ | √ | √ | √ | ||||||
腹水生產(chǎn)（3只小鼠） Ascites production (Injection on 2 mice) | 0.5 | √ | √ | √ | √ | |||||
非同家族免疫球蛋白負(fù)篩 Different isotype immunoglobulin negative screening | 0.5 | √ | √ | √ | √ | |||||
腹水生產(chǎn)（5只小鼠） Ascites production (Injection on 3 mice) | 1 | √ | √ | √ | √ | |||||
純化與檢測(cè) Purification and detection | 0.5 | √ | √ | √ | √ | |||||
總周期（月） Total lead time(months) | 4~6 | 6~8 | 4~6 | 6~8 | 5~7 | 6.5~8.5 | >6 | >8 | ||
注：
請(qǐng)慎重考慮周期事宜，以上時(shí)間僅為理想條件下短周期；
為了縮短試驗(yàn)周期建議考慮自行提供抗原直接免疫做起；
免疫環(huán)節(jié)設(shè)立驗(yàn)收節(jié)點(diǎn)，效價(jià)合格，取脾臟，效價(jià)不合格，終止實(shí)驗(yàn)；
抗體庫(kù)構(gòu)建步驟啟動(dòng)之前，至少支付此步驟的50%全款；完成項(xiàng)目，支付尾款。
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