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TE-13-LUC人食管癌熒光素酶標記細胞 培養(yǎng)步驟

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2020年05月12日 15:43  

【產(chǎn)品介紹:TE-13-LUC人食管癌熒光素酶標記細胞 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定

熒光素酶在催化Luciferin氧化成oxyluciferin的過程中,會發(fā)生生物熒光,利用這種特性,可以靈敏高效地檢測基因表達。將LUC基因整合到腫瘤細胞系上,在細胞分裂、轉(zhuǎn)移、分化過程中,熒光素酶均能得到持續(xù)穩(wěn)定的表達,因此可廣泛應(yīng)用于腫瘤細胞體內(nèi)體外試驗。

白澤醫(yī)療可提供多種LUC標記腫瘤細胞株,包括肺癌、肝癌、胃癌、卵巢癌、宮頸癌等。原始細胞株來源于美國ATCC,來源明確、質(zhì)量可靠。LUC標記細胞株均經(jīng)過嚴格的支原體、無菌等檢測;除常規(guī)的熒光驗證之外,白澤醫(yī)療還進行了抗原標記驗證,可用于EGFR、HER2、MUC1、IGFR等抗體藥物研發(fā)及相關(guān)研究。

細胞株均凍存于10%DMSO,便于運輸儲存。

來源組織:腎

物種來源:人

腫瘤類型:腎癌

母細胞來源:ATCC(CRL-1932)

運輸方式:干冰運輸

儲存條件:液氮

應(yīng)用:

•     監(jiān)控早期癌細胞發(fā)育。

•     監(jiān)控體內(nèi)癌細胞生長和代謝。

•     評估動物總體腫瘤負擔。

•     其他動物實驗體內(nèi)治療結(jié)果跟蹤。
產(chǎn)品名稱:TE-13-LUC人食管癌熒光素酶標記細胞 培養(yǎng)步驟 含STR鑒定
?產(chǎn)品編號: CL0028
?細胞數(shù)量: 1*10^6
?細胞來源: atcc
?組織來源: 胸主動脈平滑肌
?細胞種屬: 大鼠源
?生長特性: 貼壁
?培養(yǎng)基: DMEM+10%FBS
?形態(tài)特征: 成纖維細胞
?傳代方法: 1:2 - 1:3
?培養(yǎng)條件: 胎牛血清至終濃度為10%。環(huán)境:空氣,95%;二氧化碳(CO2),5%;溫度,37℃
?細胞描述: 當培養(yǎng)物達到穩(wěn)定期時,細胞表現(xiàn)出酶肌激酶和肌酸磷酸激酶(CPK)的活性增加。 肌肉型CPK在細胞分裂停止后合成。
?細胞凍存: 液氮凍存(凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO)
?細胞運輸: 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25瓶)
注意事項
凍存細胞接收后的處理:
1.干冰運輸,收到細胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇;
2.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯(lián)系。

復(fù)蘇細胞接收后的處理:
1.收到細胞后,請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液,培養(yǎng)液是否混濁,如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后,在顯微鏡下確認細胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片,若有貼壁細胞脫落,可收集上清離心,將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當天不要消化處理,如果細胞長滿90%,可選擇傳代處理。
4.如您收到細胞3天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問題,出現(xiàn)的細胞問題將不提供免費重發(fā)服務(wù)。

細胞培養(yǎng)方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

Ishikawa-GFP人子宮內(nèi)膜癌細胞-綠色標記
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JK(Jurkat)-GFP人淋巴細胞瘤細胞-綠色標記
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