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鏈霉親和素系列

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2020年05月20日 16:52  

鏈霉親和素系列專題

    —— 一品多用,實現(xiàn)大價值


一 背景介紹

鏈霉親和素是一種來源于阿維丁鏈霉菌(streptomyces avidinii)的生物素結(jié)合蛋白質(zhì),其非特異性結(jié)合遠(yuǎn)比親和素低,且與蛋清親和素在中性pH值具有凈正電荷和包含大約7%的碳水化合物相比,鏈霉親和素蛋白具有在中性pH值幾乎沒有凈電荷,不含有碳水化合物等更有利的化學(xué)性質(zhì),所以它被廣泛用來作為抗生物素蛋白的替代品。


二 產(chǎn)品特點

四聚體結(jié)構(gòu)鏈霉親和素同源四聚體的形式存在,大小為66Kda

親和力強(qiáng):分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合,兩者之間的親和力極為強(qiáng)烈;

用途廣:鏈霉親和素-生物素復(fù)合物的解離常數(shù)處于 10 mol/L 數(shù)量級,這一性質(zhì)常用于分子生物學(xué)用途;在大多數(shù)應(yīng)用中,可以與抗生素蛋白抗體相互替代。

提?。?/span>streptomyces avidinii菌提純獲得;


圖1鏈霉親和素


三 產(chǎn)品應(yīng)用

應(yīng)用一 鏈霉親和素純化樹脂


1 應(yīng)用原理

基于鏈霉親和素與生物素之間的相互作用,將鏈霉親和素高度交聯(lián)于6%瓊脂糖上,*的制備工藝使其具有更高的物理化學(xué)特性,可以耐受更高的壓力,在相對較高的流速下,實現(xiàn)對目的蛋白的純化,更適于工業(yè)大規(guī)模蛋白的純化。

圖2 鏈霉親和素樹脂的純化原理


2 Yeasen致力于為您提供效率高的產(chǎn)品,為您純化得到更的蛋白。

圖3 鏈霉親和素樹脂純化后的蛋白


3 常見問題

問題

可能原因

推薦解決方案

柱子反壓過高

填料被堵塞

清洗樹脂。

裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上樣前用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾,或離心去除。

樣品太黏稠

樣品中含高濃度的核酸,延長破碎時間直至粘度降低,或添加DNaseI (終濃度為5µg/ml),Mg2+(終濃度1mM),冰上孵育10-15min

緩沖液太黏稠

有機(jī)試劑或蛋白穩(wěn)定試劑(如甘油等)可能會引起反壓增高,降低操作流速。

洗脫組分中無目的蛋白

過度的裂解使目的蛋白變性

使用溫和的裂解條件,實驗條件以經(jīng)驗為準(zhǔn)。

目的蛋白聚集產(chǎn)生沉淀

在細(xì)胞裂解前溶液中加入DTT,終濃度為1-10 mM

目的蛋白沒有*洗脫下來

洗脫體積太少

增加洗脫液體積,減小洗脫流速。

洗脫液中鹽酸胍的pH 發(fā)生改變

使用新鮮配制的洗脫液

洗脫液孵育時間不夠

增加洗脫液與凝膠的孵育時間


應(yīng)用二 熒光基團(tuán)及酶偶聯(lián)物標(biāo)記的鏈霉親和素

圖4 不同標(biāo)記的鏈霉親和素


1 酶偶聯(lián)物標(biāo)記的鏈霉親和素

• 辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈和親霉素

1)由高純度的鏈霉親和素和辣根過氧化物酶,通過特殊的偶聯(lián)技術(shù)生產(chǎn);

2)保持了過氧化物酶的高比活性。

 應(yīng)用于免疫組化(IHC、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC、原位雜交(ISH等領(lǐng)域。

 推薦使用濃度:0.01-0.1 µg/mL for WB(化學(xué)發(fā)光法);1-2µg/mL for ELISA,HC/ICCWB(底物顯色


• 堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉親和素

1)適合于固相分析,組織/細(xì)胞染色系統(tǒng)和印跡應(yīng)用,選擇特定的共價連接;

2)綴合物穩(wěn)定并高活性。

 應(yīng)用于免疫組化(IHC、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC、酶聯(lián)免疫斑點法(ELISPOT、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA、原位雜交(ISH印跡應(yīng)用。

 推薦使用濃度1-2 µg/mL for ELISA, IHC/ICC;0.1-1 µg/mL for WB


2 熒光基團(tuán)標(biāo)記的鏈霉親和素

• Fluor®熒光素標(biāo)記鏈霉親和素

1)推薦用于常規(guī)免疫熒光;

2)高度純化并具有非常低的非特異性結(jié)合特性;

3)對生物素具有較高的親和力;

 應(yīng)用于免疫熒光(IF、原位雜交(ISH、流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cyt。

 推薦使用濃度0.5-2 µg/mL(IF

• DyLight™ 染料標(biāo)記鏈霉親和素

1)在免疫熒光、原位雜交或流式細(xì)胞術(shù)等應(yīng)用中可用于檢測生物素化的二抗和其他大分子;

2)高度純化并具有非常低的非特異性結(jié)合特性;

3)對生物素具有*的親和力;

4)高光穩(wěn)定性、pH不敏和更亮的熒光;

 應(yīng)用于免疫熒光(IF、原位雜交(ISH流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cyt。

 推薦使用濃度0.5-2 µg/mL(IF


四 產(chǎn)品信息

產(chǎn)品系列

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

鏈霉親和素純化系列

Streptavidin Agarose Resin 6FF 鏈霉親和素瓊脂糖純化樹脂

20512ES08

5 mL

1586.00

20512ES25

5 mL×5

6356.00

20512ES60

100 mL

16796.00

BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1ML 生物素分子純化預(yù)裝柱,1ML

20513ES03

1 mL

428.00

20513ES08

1 mL×5

1328.00

BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 5ML 生物素分子純化預(yù)裝柱,5ML

20514ES08

5 mL

1158.00

20514ES25

5 mL×5

4958.00

酶偶聯(lián)物標(biāo)記的鏈霉親和素

HRP Streptavidin

辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素

35105ES60

100 µL

436.00

AP Streptavidin

堿性磷酸酶標(biāo)記鏈霉親和素

35106ES60

100 µL

436.00

鏈霉親和素

Streptavidin鏈霉親和素

35101ES03

1 mg

326.00

35101ES08

5 mg

876.00

35101ES10

10 mg

1466.00

35101ES60

100 mg

2856.00

35101ES80

1 g

9586.00



熒光基團(tuán)標(biāo)記的鏈霉親和素

DyLight 405™標(biāo)記鏈霉親和素

DyLight 405™ Streptavidin

35102ES60

100 µL

436.00

Alexa Fluor® 488標(biāo)記鏈霉親和素

Alexa Fluor® 488 Streptavidin

35103ES60

100 µL

436.00

Alexa Fluor® 647標(biāo)記鏈霉親和素

Alexa Fluor® 647 Streptavidin  

35104ES60

100 µL

436.00

Alexa Fluor® 594標(biāo)記鏈霉親和素

Alexa Fluor® 594 Streptavidin

35107ES60

100 µL

436.00

Cy3標(biāo)記鏈霉親和素

Cy3-conjugated Streptavidin

35108ES80

1 mg

1988.00


HB190724


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