膠原酶

——動(dòng)物組織消化利器

圖1：膠原酶

產(chǎn)品介紹

膠原酶（Collagenase）是一類能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列（該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中，很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中），并切割該序列中的中性氨基酸（X）和甘氨酸（Gly）之間的肽鍵的肽鏈內(nèi)切酶，且能夠水解結(jié)締組織中的膠原蛋白。

許多蛋白酶都能水解單鏈和變性的膠原多肽，但膠原酶是唯——種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶，其廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)，其中有效的膠原酶是由厭氧細(xì)菌溶組織梭菌（Clostridium histolyticum）分泌的“粗”膠原酶。

翊圣膠原酶來(lái)源于溶組織梭菌（Clostridium histolyticum），是一種酶“粗”提物，不僅含有能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維的膠原酶，還含有其他的一些蛋白酶如多糖酶、脂酶等，能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白、多糖和脂質(zhì)等，因此更適用于組織消化。

目前市面上的細(xì)菌膠原酶依據(jù)膠原酶的活性差異主要分為5種類型：膠原酶I型，II型，III型，IV型和V型等。

膠原酶的選擇

  *CDU = collagen digestion units

產(chǎn)品特性

1、消化效率高：溶組織梭菌的酶粗提物，對(duì)組織消化效率高。

2、依賴于活化劑：膠原酶需要借助二價(jià)陽(yáng)離子如Ca²⁺、 Zn²⁺等活化酶的活性。

3、受抑制劑影響：膠原酶的抑制劑有EDTA 、EGTA等；二是重金屬離子（Hg²⁺,Pb²⁺,Cd²⁺）；還有一些化學(xué)試劑如Cysteine、histidine、DTT、2-mercaptoethanol、o-phenanthroline等對(duì)膠原酶也有抑制作用。

4、耐干擾性強(qiáng)：膠原不會(huì)受到培養(yǎng)細(xì)胞所用的血清影響。

更具競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格

  圖2：價(jià)格對(duì)比圖

FAQ

一、 使用方法：在Hank’s，Earle’s 或者其他平衡鹽溶液中溶解，推薦使用工作濃度0.05 % ~0.5 % (w/v) 

二、 存儲(chǔ)溫度： 2-8℃

三、 使用建議：

①對(duì)于膠原蛋白結(jié)構(gòu)和生物合成研究，常使用更高純度的膠原酶制劑，不含其他蛋白水解活性。

②對(duì)于組織解離，常使用粗制膠原酶制劑，例如彈性蛋白酶，胰蛋白酶或木瓜蛋白酶等。

四、常見(jiàn)問(wèn)題：

1、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中消化作用不佳

①如果是酶活不強(qiáng)或鈣離子不足導(dǎo)致，應(yīng)在低溫干燥條件下儲(chǔ)存膠原酶，膠原酶溶液分裝后凍存

②如果是鈣離子不足導(dǎo)致，應(yīng)將膠原酶溶液中鈣離子濃度設(shè)置為5mM。

2、使用過(guò)程中出現(xiàn)細(xì)胞死亡

①如果是蛋白酶過(guò)量，應(yīng)減少蛋白酶接觸時(shí)間或是加入白蛋白或滅活血清

      ②如果是pH 改變應(yīng)使用緩沖液（如HBSS）；經(jīng)常檢查并重新調(diào)節(jié)pH
      ③如果氧氣太少，應(yīng)給消化液通無(wú)菌空氣

3、實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)細(xì)胞受損

 如果是蛋白酶過(guò)多導(dǎo)致，應(yīng)減少蛋白酶用量或是加入白蛋白或滅活血清

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HB20190905