Hieff NGS® MaxUp II Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina

——兼容常規(guī)與鏈特異性mRNA文庫構(gòu)建

背景簡介
RNA被認(rèn)為是生物信息傳遞的“橋梁”。而轉(zhuǎn)錄組測(cè)序可利用NGS技術(shù)對(duì)組織或者細(xì)胞中的RNA反轉(zhuǎn)錄之后的cDNA文庫測(cè)序，通過分析可計(jì)算不同RNA的表達(dá)量、發(fā)現(xiàn)新的轉(zhuǎn)錄本、進(jìn)行轉(zhuǎn)錄本定位、分析可變剪切、檢測(cè)基因融合等，提供全面的轉(zhuǎn)錄組信息。

圖 遺傳學(xué)中心法則
 

目前主流的mRNA建庫主要流程是mRNA純化，mRNA逆轉(zhuǎn)錄，雙鏈cDNA合成，末端修復(fù)，A尾添加，接頭連接，純化/分選，文庫擴(kuò)增，時(shí)間上需要1.5 d甚至更久。
翊圣生物結(jié)合自身多年的分子酶創(chuàng)新研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，推出升級(jí)版快速mRNA建庫試劑盒，可在短的時(shí)間進(jìn)行高效建庫。助力獲得優(yōu)異的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)。

亮點(diǎn)一覽
1、建庫快速：完整建庫比主流方法縮減1.5-2 h，1 d內(nèi)獲得高質(zhì)量文庫。

圖 升級(jí)版建庫試劑盒建庫流程
 

2、兼容常規(guī)與鏈特異性文庫構(gòu)建
本產(chǎn)品搭配兩種二鏈合成buffer，即含dNTP（常規(guī)建庫）與dUTP（鏈特異性建庫），可兼容兩種模式的mRNA文庫構(gòu)建。一個(gè)盒子兩種用處，不用再額外備貨。

3、高效逆轉(zhuǎn)錄酶，更適合復(fù)雜模板
RNaseH能特異的降解RNA-DNA雜交分子中RNA的特性，將RNA降解成小片段，影響反轉(zhuǎn)錄效率。YEASEN提供的第四代Hifair逆轉(zhuǎn)錄酶，去除RNase H活性，同時(shí)溫度的耐受性高達(dá)65℃，有利于復(fù)雜RNA模板二級(jí)結(jié)構(gòu)的打開，更利于逆轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行。

硬核支撐
以1 μg的標(biāo)準(zhǔn)品RNA（Agilent#740000）為起始，分別構(gòu)建鏈特異性文庫和非鏈特異性文庫，質(zhì)控后的文庫用illumina Hiseq X-10 PE150測(cè)序。

1. 優(yōu)異的測(cè)序質(zhì)量

1. 表達(dá)重復(fù)性高

1. 優(yōu)異的文庫均一性

1. rRNA殘留更低，有用數(shù)據(jù)更多

1. 鏈特異性建庫：98.5%的Reads比對(duì)到正義鏈上

客戶案例
單位：廣州某生物公司J*
樣本：草莓，油菜，核盤菌
結(jié)論：高質(zhì)量文庫，優(yōu)異的測(cè)序數(shù)據(jù)

1. 文庫報(bào)告

1. 測(cè)序質(zhì)量

1. 數(shù)據(jù)比對(duì)

1. 數(shù)據(jù)分布

1. 基因覆蓋度分析

單位：上海某生物公司O*
樣本：人，大鼠，西瓜
結(jié)論：高質(zhì)量文庫，優(yōu)異的測(cè)序數(shù)據(jù)

1. 建庫報(bào)告

1. 測(cè)序質(zhì)量

1. 數(shù)據(jù)比對(duì)

1. 數(shù)據(jù)分布

1. 基因覆蓋度分析

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