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MPbio:LSM 人淋巴細胞分離液

來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2020年06月17日 19:25  

產(chǎn)品詳細描述

 

LSM淋巴細胞分離液

LYMPHOCYTE SEPARATION MEDIUM

用途:

用于體外分離外周血淋巴細胞,也可以從其他來源中分離單核細胞,包括臍帶血細胞和骨髓細胞。

方法概述:

早期分離白細胞的方法,會用一種化合物混合血液。此化合物能夠聚集紅細胞,只輕微影響白細胞。通過離心,紅細胞由于密度增加而聚集沉淀,同時從離心管內(nèi)上層收集白細胞。

Böyum提出了一種更方便快速的分離方法,即以Ficoll®-甲泛影鈉溶液為介質(zhì)進行離心。稀釋的血液在Ficoll-甲泛影鈉溶液中分層,之后低速短時離心。紅細胞和多形核粒細胞沉降到管底,單個核細胞(淋巴細胞)和血小板可以從兩個分層間的分界面處收集。

許多研究者不斷改進了Böyum方法,對于MP生物醫(yī)學(xué)公司生產(chǎn)的LSM,其方法的*之處在于成功運用泛影酸鈉代替了甲泛影鈉。

程序原理:

去纖維蛋白或肝素化人血以1:1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋,在分離溶液中分層,低速離心30min。離心過程中,由于差速遷移終形成不同的細胞層。

聚集在管底的顆粒主要是紅細胞和多形核粒細胞,它們通過梯度遷移至管底。由于其密度不同,淋巴細胞和其他單個核細胞(單核細胞和血小板)分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細胞可以通過吸取分界層溶液回收,后進一步清洗去除血小板,LSM和血漿。

試劑:

LSM® 是一種濾膜過濾除菌的溶液,每100ml包含6.2g聚蔗糖和9.4g泛影酸鈉。20℃下密度是1.0770-1.0800g/ml。

使用說明:

以下的操作步驟是初由Böyum.設(shè)計的程序中眾多改良版本的一種。此程序經(jīng)改良用于去纖維蛋白或抗凝血劑處理過的人體血液;對于其他物種或者其他組織的血液,改變此程序也許是有必要的。

1. 輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合

2. 無菌轉(zhuǎn)移3 ml LSM到15 ml離心管中。

3. 混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液 和2 ml 生理鹽水

4. 仔細的將稀釋血液加入含有3 ml LSM(室溫)的15ml離心管中,在血液和LSM中形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混合入LSM中。

5. 室溫下400xg離心15-30min,離心可以沉淀紅細胞和多形核白細胞,同時可以在LSM上形成一層單核淋巴細胞,如上圖所示(具體分層情況為血漿層-單個核細胞層-LSM層-RBC顆粒)。

6. 吸出淋巴細胞上方2-3mm的血漿。

7. 吸取淋巴細胞層以及它下面一半的LSM,并轉(zhuǎn)移到另外一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細胞層中,室溫(18-25°C)離心10分鐘,離心速度設(shè)定在既不損傷細胞又能沉淀細胞即刻,例如160 – 260 xg(清洗去除LSM,并降低血小板的百分比)。

8. 再用平衡鹽緩沖液清洗細胞,后用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細胞。

 

訂購信息:相當(dāng)于sigma公司的Histopaque®-1077產(chǎn)品

 

貨號

規(guī)格

單價

*

淋巴細胞分離液MPbio公司產(chǎn)品)

0850494X

100ML

362

280

0850494

100ML*5

1587

1400

相當(dāng)于sigma公司的Histopaque®-1077產(chǎn)品

也相當(dāng)于GE公司的Ficoll-Paque PREMIUM

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廠家說明

MP Biomedicals生物醫(yī)學(xué)公司是位于美國加利福尼亞州的生命科學(xué)和生物技術(shù)廠商。2004年底成功收購Qbiogene、ICN,現(xiàn)在有5個大型倉庫,能夠及時供應(yīng)各行業(yè)需求,亞洲倉庫位于新加坡。它致力于生命科學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究和探索。目前它提供55000多種產(chǎn)品,是世界上能全面提供生命科學(xué)產(chǎn)品和臨床診斷產(chǎn)品的幾家廠商之一。

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