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長(zhǎng)時(shí)間使用純水沖洗離子色譜柱會(huì)對(duì)其有影響
用純水短時(shí)間內(nèi)沖洗離子色譜柱，通常不會(huì)對(duì)色譜柱造成較大的損傷，但如果長(zhǎng)時(shí)間用水沖洗色譜柱則可能引起固定相流失和相塌陷現(xiàn)象，所以若非必要請(qǐng)盡量避免用純水沖洗色譜柱。建議在水中加入一定量的甲醇或乙腈進(jìn)行沖洗，通常水的含量<90%不會(huì)對(duì)色譜柱造成任何影響。
原因分析：
1.由于目前所用的色譜柱大多以硅膠為基質(zhì)，硅膠的溶解特點(diǎn)是在純水中的溶解度比在含有一定濃度有機(jī)溶劑的流動(dòng)相中要大得多，所以長(zhǎng)時(shí)間的用純水沖洗會(huì)導(dǎo)致固定相的流失，引起柱效下降。
2.對(duì)于常規(guī)的 C18 柱而言，由于C18 長(zhǎng)鏈與水是不互溶的，C18 長(zhǎng)鏈之間的相互作用力大于C18 與水分子的作用力，長(zhǎng)時(shí)間的用水沖洗，使得C18 長(zhǎng)鏈之間相互靠近，水流的沖刷，導(dǎo)致相互聯(lián)結(jié)的C18 長(zhǎng)鏈倒伏在硅膠基質(zhì)的表面，對(duì)疏水性物質(zhì)的保留能力下降，即相塌陷。有些廠(chǎng)家推出了適于做離子色譜柱沖洗的純水柱，這種純水柱可以用純水作流動(dòng)相而不會(huì)產(chǎn)生相塌陷，這對(duì)只溶于純水的樣品的分析提供了一個(gè)很好的選擇。
3.如使用過(guò)含緩沖鹽的流動(dòng)相的色譜柱，用純水沖洗，并一定能將緩沖鹽*洗去。因?yàn)?，由于緩沖鹽難溶于有機(jī)溶劑，C18 反相柱中用的填料是在硅膠表面上接上許許多多的C18 長(zhǎng)鏈，相當(dāng)于一個(gè)疏水的有機(jī)相，而硅膠基體被有機(jī)物質(zhì)包裹著，所以用純緩沖鹽水溶液做流動(dòng)相時(shí)也許緩沖鹽不容易到達(dá)硅膠基質(zhì)，不至損害基體。但所用的流動(dòng)相通常會(huì)含一部分有機(jī)溶劑，而且這些有機(jī)溶劑與C18長(zhǎng)鏈?zhǔn)腔ト艿模虼擞袡C(jī)溶劑的加入增強(qiáng)了流動(dòng)相滲入硅膠基質(zhì)的能力，能使部分緩沖鹽達(dá)到硅膠基質(zhì)。
同樣的道理，用純水沖洗只能洗掉表面的緩沖鹽，而滲入深處的緩沖鹽則仍然殘留在那里。所以建議在水中加入部分有機(jī)溶劑進(jìn)行沖洗，一般的C18柱通常用含水20％～90％都可以，含水的比例要視分析時(shí)使用的流動(dòng)相來(lái)定，原則上，用于沖洗的流動(dòng)相中水的比例應(yīng)該等于或高于（緩沖鹽用后清洗的情況，推薦使用“等于”）分析時(shí)所用流動(dòng)相中水的比例。
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