蛋白提取系列專題

-多方位獲取您所需要的樣本蛋白

背景介紹

蛋白質(zhì)種類很多，在理化特性方面差異較大，因此不可能有一個固定的程序適用各類蛋白質(zhì)的分離。動物蛋白提取一般遵循如下原則：盡可能提高蛋白的溶解度，抽提大量的總蛋白，減少蛋白質(zhì)的損失；減少對蛋白質(zhì)的人為修飾；破壞蛋白與其他生物大分子的相互作用，并使蛋白質(zhì)處于*變性狀態(tài)。

產(chǎn)品信息

1、裂解液形式：

RIPA裂解液（Radio Immunoprecipitation Assay Lysis buffer，放射免疫沉淀法裂解緩沖液）是一種傳統(tǒng)的可用于裂解細胞或組織的快速裂解液，其原理為利用表面活性劑等裂解細胞膜（包括核膜），從組織或動物細胞中抽取可溶性蛋白。RIPA裂解液裂解后得到的蛋白一般可直接用于常規(guī)的WB、IP、co-IP等實驗。

2、Kit形式：

蛋白提取實驗是蛋白功能研究，客戶可購買商品化的蛋白提取試劑盒。圖1簡單的介紹了不同部位蛋白提取所利用的提取試劑盒，并且需要注意以下事項：

（1）所要研究的樣本種屬----動物 、植物、細菌、真菌、昆蟲、酵母等；

（2）蛋白獲得的部位----總蛋白、膜蛋白、核蛋白、跨膜蛋白等；

（3）下游的實驗---考慮提取得到蛋白的活性等；

圖1 細胞不同組織部位蛋白提取

產(chǎn)品特點

FAQ

1.如何選擇合適的RIPA裂解液？

如果您只是要做普通的WB、IP或者co-IP，我們建議您使用免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)，該裂解液在裂解細胞或組織后一般不會形成粘滯的透明狀DNA團塊，不必采用超聲處理就可進行下一步操作。同時，該裂解液還適用于磷酸化蛋白的WB檢測。

如果使用免疫印跡及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液(20118)的效果不是很好，那您的蛋白可能比較特殊，我們建議您可以嘗試另外幾種裂解液。如果您的蛋白是難溶性的蛋白，建議您可以嘗試使用裂解強度更高的裂解液，如RIPA裂解液(強/中)；如果您在做IP實驗的時候發(fā)現(xiàn)背景很高，即有很多非特異性蛋白被IP下來，這時候您需使用裂解強度較強的裂解液，比如RIPA裂解液(強/中)。反之，如果您發(fā)現(xiàn)目的蛋白無法IP下來，則說明您使用的裂解液強度過強，此時需使用裂解強度較弱的裂解液，比如RIPA裂解液(弱)。

2. RIPA裂解液可以獲得細胞中的不同蛋白嗎？

RIPA裂解液提取的是全蛋白，包括核蛋白、漿蛋白、膜蛋白等。如果要提取特定的蛋白（如：核蛋白、膜蛋白）則可利用專門提這類蛋白的試劑盒進行提取。

文獻引用

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20126ES50 和20101ES60  IF:4.522

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RIPA   IF: 4.067

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RIPA   IF: 3.648

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20126ES50  IF: 3.559

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相關(guān)產(chǎn)品

HB200619