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RENJIEBIO:教您血清、血漿如何分離

來源:上海仁捷生物科技有限公司   2020年07月03日 09:43  

RENJIBIO:教您血清、血漿如何分離

血清制備方法:

使用無熱原無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液樣本,將試管或離心管在室內(nèi)溫度下放置自然凝固(視室溫環(huán)境10分鐘到2小時不等)或4℃過夜,分離出血清,(建議傾斜試管或離心管以擴大液面的橫截面,使血清能更大程度的分離出來,),2-6℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,立即進行測定,建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,避免反復凍融,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。


血漿制備方法:

應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、肝素鈉、枸櫞酸納或檸檬酸鈉作為抗凝劑,使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本,采集后30分鐘內(nèi),混合10-20分鐘后,2-6℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清液(血漿),建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存,避免反復凍融。樣本應避免溶血或高血脂。保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。


血清、血漿分離的注意事項:

血清、血漿分離過程中特別需要注意兩點:防止溶血和細胞混入。


1.快:血液環(huán)境的穩(wěn)定性與保存時間的長短呈反比,細胞膜的穩(wěn)定性也在下降,在這種情況下,應盡快開展血清、血漿的分離,并嚴格按照操作說明進行,避免出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,血清、血漿分離后務必避免反復凍融。


2.慢:離心速度不能過快,過快的離心速度會造成紅細胞壓積,容易產(chǎn)生溶血。


3.冷:血液樣品如不能馬上進行血清或血漿的分離,則盡量冷藏保存和運輸,但是,不能冷凍,否則血細胞會形成冰晶造成細胞破裂而溶血。


RENJIEBIO小知識:
1.抗凝劑選擇:不同的抗凝劑有其不同的分子構型,會對血液中各細胞的細胞膜產(chǎn)生不同的作用,有的會增加細胞膜的穩(wěn)定性,有的會降低細胞膜的穩(wěn)定性,所以選擇一款合適的抗凝劑至關重要(檢測前請仔細閱讀ELISA試劑盒說明書,查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求)。


2.樣品處理不當?shù)奈:Γ貉捍娣胚^程中溫度過高或反復凍融對細胞膜有很大的損害。溫度過高及反復凍融會使細胞膜上的結構蛋白構象發(fā)生改變,進而造成細胞膜的彈性降低以致破解產(chǎn)生溶血現(xiàn)象,所以用于分離血清、血漿的血液應避免反復凍融。


血清質(zhì)量是怎樣影響檢測的?

1. 溶血:紅細胞的破裂會引起血漿成分的改變,對一些生化項目如谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、鉀的測定結果造成較大的影響。若進行抗體類檢測本身血清的顏色會干擾到終的酶標儀讀數(shù)。


2. 脂血:在運用比色法和比濁法檢測的項目中,脂血中的乳糜微粒具有散射光的特性不能通過雙波長進行消除從而影響檢測結果。


3. 黃疸:黃疸的血清中含有膽紅素,若樣本放置時間過長或通過氧化劑后膽紅素還可被氧化為膽綠素、膽褐素,這些色素在不同波長范圍具有一定的光吸收,從而影響檢驗結果。


常見的血液生化指標與激素

常見的血液生化指標:血糖(GLU)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Crc)、尿素氮(BUN)、膽固醇(CHO)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、鎂、鈣等。


常見的激素:睪酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、游離三碘甲腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)等。

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