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BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌綠色標(biāo)記細(xì)胞 處理方法

來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2020年07月05日 16:34  

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司新增細(xì)胞庫(kù),具有自己的研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)庫(kù),上千株細(xì)胞具有STR鑒定,開學(xué)大放送,*,同時(shí)還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。

產(chǎn)品名稱:BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌綠色標(biāo)記細(xì)胞 處理方法
·細(xì)胞數(shù)量: 1*10^6
·細(xì)胞種屬: 人源
·生長(zhǎng)特性: 貼壁
·培養(yǎng)基: DMEM-H
·形態(tài)特征: 成纖維細(xì)胞樣
·傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
·培養(yǎng)條件: 胎牛血清至終濃度為10%。環(huán)境:空氣,95%;二氧化碳(CO2),5%;溫度,37℃
·細(xì)胞描述: 親本L的亞克隆,是早建立的連續(xù)傳代細(xì)胞之一,L細(xì)胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下網(wǎng)眼狀空隙和脂肪組織。APRT+,HPRT+。
·細(xì)胞凍存: 液氮凍存(凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO)
·細(xì)胞運(yùn)輸: 干冰運(yùn)輸(2ml凍存管)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T25瓶)
 
BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌綠色標(biāo)記細(xì)胞 處理方法
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣  
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng) 

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS  
細(xì)胞周期分為細(xì)胞間期和細(xì)胞分裂期,細(xì)胞間期較長(zhǎng),而細(xì)胞分裂期較短。
細(xì)胞間期是為細(xì)胞分裂的準(zhǔn)備時(shí)期,表現(xiàn)為細(xì)胞增大,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)增多。細(xì)胞分裂期則是一個(gè)細(xì)胞由兩個(gè)細(xì)胞分解為一個(gè)細(xì)胞的過程。
細(xì)胞是生命的基本單位,細(xì)胞的特殊性決定了個(gè)體的特殊性,因此,對(duì)細(xì)胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關(guān)鍵。細(xì)胞生物學(xué)已經(jīng)成為當(dāng)代生物科學(xué)中發(fā)展快的一門學(xué)科,是生物、農(nóng)學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧、水產(chǎn)和許多生物相關(guān)專業(yè)的一門必修課程。
依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無菌操作臺(tái)內(nèi)取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培養(yǎng)基, 混 合均勻,放入37 °C,5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
 
培養(yǎng)步驟:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
1、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。
2、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,進(jìn)行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
 
PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。
 
上海琛藝是一家專業(yè)從事細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品的公司,擁有獨(dú)立細(xì)胞房(可隨時(shí)約定參觀),供應(yīng)胎牛血清,STR鑒定細(xì)胞,感受態(tài)細(xì)胞等,專業(yè),專注,性價(jià)比高,是您Shou選之家。

NCI-H1299-LUC

人肺腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

NCI-H1299-GFP

人肺腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

H9c2(2-1)-LUC

大鼠心肌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

H9c2(2-1)-GFP

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HCCLM3-LUC

人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

HCCLM3-GFP

人肝癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

hct116/L-LUC

人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株-熒光素酶標(biāo)記

hct116/L-GFP

人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株-綠色標(biāo)記

HCT-116-LUC

低分化結(jié)腸腺癌-熒光素酶標(biāo)記

HCT-116-GFP

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HCT9/FU-GFP

人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株-綠色標(biāo)記

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人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

HCT9/Taxol-GFP

人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株-綠色標(biāo)記

HCT-8/V-LUC

人結(jié)腸癌長(zhǎng)春新堿耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

HCT-9/V-GFP

人結(jié)腸癌長(zhǎng)春新堿耐藥株-綠色標(biāo)記

HCT-8-LUC

人結(jié)腸癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

HCT-8-GFP

人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

HEC-1-A-LUC

人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

HEC-1-A-GFP

人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

HEC-1-B-LUC

人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

HEC-1-B-GFP

人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

HeLa-LUC

人宮頸癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

HeLa-GFP

人宮頸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

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人喉表皮癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

Hep-2-GFP

人喉表皮癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

Hep3B-LUC

人肝癌-熒光素酶標(biāo)記

Hep3B-GFP

人肝癌-綠色標(biāo)記

HepG2-LUC

人肝癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

HepG2-GFP

人肝癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

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人胃癌細(xì)胞(未分化)-熒光素酶標(biāo)記

HGC-27-GFP

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人成纖維肉瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

HT1080-GFP

人成纖維肉瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記

HT-29-LUC

人結(jié)腸癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記

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人肝癌-熒光素酶標(biāo)記

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人肝癌-綠色標(biāo)記

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人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞-熒光素標(biāo)記

HUVEC-GFP

人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞-綠色熒光標(biāo)記

IEC-6-LUC

大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

IEC-6-GFP

大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞-綠色標(biāo)記

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人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

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人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞-綠色標(biāo)記

K562/Adr-LUC

人白血病阿霉素耐藥株-熒光素酶標(biāo)記

K562/Adr-GFP

人白血病阿霉素耐藥株-綠色標(biāo)記

K562-LUC

人白血病細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

K562-GFP

人白血病細(xì)胞-綠色標(biāo)記

KB-LUC

人口腔上皮癌細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記

 

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