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BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌綠色標記細胞 處理方法

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2020年07月05日 16:34  

上海琛藝實業(yè)有限公司新增細胞庫,具有自己的研發(fā)細胞培養(yǎng)庫,上千株細胞具有STR鑒定,開學大放送,*,同時還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。

產(chǎn)品名稱:BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌綠色標記細胞 處理方法
·細胞數(shù)量: 1*10^6
·細胞種屬: 人源
·生長特性: 貼壁
·培養(yǎng)基: DMEM-H
·形態(tài)特征: 成纖維細胞樣
·傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
·培養(yǎng)條件: 胎牛血清至終濃度為10%。環(huán)境:空氣,95%;二氧化碳(CO2),5%;溫度,37℃
·細胞描述: 親本L的亞克隆,是早建立的連續(xù)傳代細胞之一,L細胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下網(wǎng)眼狀空隙和脂肪組織。APRT+,HPRT+。
·細胞凍存: 液氮凍存(凍存液基礎培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO)
·細胞運輸: 干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25瓶)
 
BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌綠色標記細胞 處理方法
形態(tài)特性 上皮細胞樣  
生長特性 貼壁生長 

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS  
細胞周期分為細胞間期和細胞分裂期,細胞間期較長,而細胞分裂期較短。
細胞間期是為細胞分裂的準備時期,表現(xiàn)為細胞增大,營養(yǎng)物質增多。細胞分裂期則是一個細胞由兩個細胞分解為一個細胞的過程。
細胞是生命的基本單位,細胞的特殊性決定了個體的特殊性,因此,對細胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關鍵。細胞生物學已經(jīng)成為當代生物科學中發(fā)展快的一門學科,是生物、農(nóng)學、醫(yī)學、畜牧、水產(chǎn)和許多生物相關專業(yè)的一門必修課程。
依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內取 10 ml培養(yǎng)基加至 T25或 T75 flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25 或T75 flask 內之培養(yǎng)基, 混 合均勻,放入37 °C,5 % CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
 
培養(yǎng)步驟:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
 
1、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。
2、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
 
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。
 
上海琛藝是一家專業(yè)從事細胞培養(yǎng)相關產(chǎn)品的公司,擁有獨立細胞房(可隨時約定參觀),供應胎牛血清,STR鑒定細胞,感受態(tài)細胞等,專業(yè),專注,性價比高,是您Shou選之家。

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