K562/Adr細(xì)胞|人白血病阿霉素耐藥株LUC熒光素酶標(biāo)記 STR
上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進(jìn)細(xì)胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。
產(chǎn)品名稱:K562/Adr細(xì)胞|人白血病阿霉素耐藥株LUC熒光素酶標(biāo)記 STR
包裝:內(nèi)層無菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說明書
細(xì)胞來源:ATCC、sciencell、ICLC
貨期:1-2周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書面質(zhì)量問題報(bào)告并及時(shí)通知銷售人員,我們將盡快為您解決!
三、細(xì)胞生長條件:
組成:
組份
數(shù)目
細(xì)胞
1 T-25瓶
細(xì)胞說明書
一份
細(xì)胞簡介:
生長特性:
貼壁生長
細(xì)胞來源:
從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn)
培養(yǎng)條件:
培養(yǎng)基:1640 +10%FBS(推薦德國BI 04-002-1A
優(yōu)等胎牛血清)
氣相:空氣95%,二氧化碳5%
溫度:37℃
培養(yǎng):
貼壁細(xì)胞
1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行2-3小時(shí)的緩沖,.然后置于無菌操作臺(tái),打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代;
2.待細(xì)胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對(duì)其進(jìn)行傳代,di一次傳代比例為1:2。
3傳代步驟:將0.25%含EDTA胰酶置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(di一次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為佳消化時(shí)間,記錄佳消化時(shí)間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行傳代。
二、懸浮細(xì)胞
1.用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒,然后置于無菌操作臺(tái),打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;
2.將離心好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基,然后將其置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養(yǎng)基);
3.顯微鏡觀察細(xì)胞數(shù)目比較多時(shí),對(duì)其進(jìn)行傳代,di一次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養(yǎng))。
細(xì)胞總數(shù):
1~3*106
傳代周期:
2-3天
傳代比例:
1:2~1:4
換液頻率:
2-3天
凍存液:
90%FBS+10%DMSO
K562/Adr細(xì)胞|人白血病阿霉素耐藥株LUC熒光素酶標(biāo)記 STR
四、注意事項(xiàng):
1 收到細(xì)胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2 瓶中運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復(fù)使用,請(qǐng)換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)
3 對(duì)于貼壁細(xì)胞,若大部分細(xì)胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細(xì)胞重新貼壁,表明細(xì)胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉;若大部分細(xì)胞仍然不貼壁,將漂浮的細(xì)胞離心收集,用臺(tái)盼藍(lán)染色鑒定細(xì)胞活力,并與本公司銷售人員及時(shí)聯(lián)系。
4 建議客戶收到細(xì)胞后不同倍鏡各拍幾張細(xì)胞的照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),如細(xì)胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請(qǐng)于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問題,超過時(shí)間我段,本公司則默認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好,不免費(fèi)對(duì)后續(xù)細(xì)胞狀態(tài)問題進(jìn)行售后。
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