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Jurkat-Luc|Luciferase人淋巴瘤熒光酶穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株

來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2020年07月12日 11:57  

感恩回饋,價格實(shí)惠,物美價廉,量大從優(yōu),部分試劑買一送一。。。。。。

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司提供ATCC原代細(xì)胞,ATCC菌株代購,同時上海琛藝新增細(xì)胞庫,具有自己的研發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)庫,上千株細(xì)胞具有STR鑒定,開春大放送,*,同時還有好禮相送,具體歡迎咨詢我們銷售人員。。。。

Jurkat-Luc|Luciferase人淋巴瘤熒光酶穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株 

【細(xì)胞傳代】:1:3 傳代

【細(xì)胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

【細(xì)胞檢測】:細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌

【細(xì)胞凍存】:液氮凍存(基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS)

【細(xì)胞運(yùn)輸】:干冰運(yùn)輸(1 Vial)或活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)

詳細(xì)背景: 這株細(xì)胞的細(xì)胞骨架染色突出呈現(xiàn)肌動蛋白,在細(xì)胞質(zhì)中有豐富的平行微絲。有報道稱在1uM血管緊張素II存在下,它們會收縮。細(xì)胞在軟瓊脂中形成克隆,SV40大T抗原陽性。

細(xì)胞來源: 細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系

"購買細(xì)胞注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,OSKMZ-1小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞| OSKMZ-1動物

顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。

規(guī)格: 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)

細(xì)胞規(guī)格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml
 您需要準(zhǔn)備好細(xì)胞所要用到的培養(yǎng)基和相關(guān)試劑,雖然所有的貼壁,半貼壁或者懸浮細(xì)胞處理方式差不多,但是不同的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在,也會導(dǎo)致對細(xì)胞處理不當(dāng),或者環(huán)境的不適應(yīng)而造成細(xì)胞的死亡。
       1.收到細(xì)胞,di一時間要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。由于運(yùn)輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。
       2.當(dāng)通過上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有任何問題時,進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。細(xì)胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,必須恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細(xì)胞的存活率。
       3.如果經(jīng)di一步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%,并且細(xì)胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細(xì)胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細(xì)胞類型,一次少傳些,保證每瓶細(xì)胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細(xì)胞,di一次處理也可以依照第二種情況。
HBS和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles (2.2 g/L)中比在Hanks (0.35 g/L) 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡,以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2 中,溶液會變堿,Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織,需要用Eagles液,。如果僅僅是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲存的組織,用Hanks液就可以了。

 

用途:僅供科研使用。

Jurkat-Luc|Luciferase人淋巴瘤熒光酶穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株 

小鼠胚胎干細(xì)胞接收后的處理:

 

1) 收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

 

2) 請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

 

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml新的*培養(yǎng)基。

 

4) 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代。

 

5) 接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

 

 細(xì)胞培養(yǎng)步驟

 

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

 

1) 準(zhǔn)備L-15培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

 

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,100%。 溫度:37攝氏度。

 

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

A。僅供研究之用。

運(yùn)輸保存:采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。

OSKM-1小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞一般培養(yǎng)方法:

1、組織塊培養(yǎng)法

A)按照前述方法取材,將組織剪成或切成1mm3大小的小塊,并加入少許培養(yǎng)基使組織濕潤。

B)將小塊均勻涂布于瓶壁,每小塊間距0.2 cm~12.5px,一般在25mL培養(yǎng)瓶(底面積為437.5px2)可接種20~30小塊為宜,小塊放置后,輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使瓶底朝上,然后于瓶內(nèi)加入適量培養(yǎng)基蓋好瓶塞,將瓶傾斜放置在37℃溫箱內(nèi)。

C)培養(yǎng)2~4小時,待小塊貼附后,將培養(yǎng)瓶緩慢翻轉(zhuǎn)平放,靜置培養(yǎng),動作要輕,嚴(yán)禁搖動和來回振蕩,以防小鼠誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞由于沖動而使小塊漂起而造成培養(yǎng)失敗,若組織塊 不易貼壁可預(yù)先在瓶壁涂一薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。開始培養(yǎng)時培養(yǎng)基不宜多,以保持組織塊濕潤即可,培養(yǎng)24小時后再補(bǔ)液,培養(yǎng)初期移動和觀察時要輕 拿輕放,開始幾天盡量不去搬動,以利貼壁和生長,培養(yǎng)3~5天時可換液,一方面補(bǔ)充營養(yǎng),一方面去除代謝產(chǎn)物和漂浮小塊所產(chǎn)生的毒性作用。

2、消化培養(yǎng)法

該方法是采用前述的消化分散法,將妨礙細(xì)胞生長的細(xì)胞間質(zhì)(包括基質(zhì)、纖維等)去除,使細(xì)胞分散形成細(xì)胞懸液,然后分瓶培養(yǎng)。

3、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

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