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實時熒光定量PCR標準品稀釋法

來源:優(yōu)誓(北京)生物技術有限公司   2020年07月19日 11:16  

實時熒光定量PCR是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料,利用熒光信號積累對PCR反應的過程,進行實時監(jiān)控實現(xiàn)起始模板的準確定量。實時熒光定量PCR標準品梯度稀釋方法依次是選擇目標、提取/PCR、純化、測試濃度、調整濃度、梯度稀釋。一般CT值在18-30之間,覆蓋全部樣品濃度區(qū)間。和大家在分享一下10倍連續(xù)梯度稀釋方法:1V原液(標準品為i+9V稀釋緩沖液,得到標準品為ii。1V標準品ii+9V稀釋緩沖液,得到標準品為iii, 1V標準品iii+9V稀釋緩沖液,得到標準品為iv, 1V標準品iv+9V稀釋緩沖液v,切不可用標準品i分別加不同體積的稀釋緩沖液直接得到標準品ii、iiiiv、v,標準品要復管做測試,復管次數(shù)要遵循統(tǒng)計學要求。熒光PCR凍干時,制品溶液厚度不宜過厚。一般應為10-15mm,制品過厚的情形類似于濃度過高時的情況,不僅干燥的時間更長,塌陷、結塊。凍干機Pilot3-6T醫(yī)療應用涉及產(chǎn)品有:熒光PCR、免疫微球、化學發(fā)光、基因芯片、量子點、ELISA、膠體金、POCTIVD校準品質控品校準品、內毒素檢測試劑、血清、白蛋白、干細胞及相應提取物等。

型號

Pilot3-6T

Pilot5-8T

Pilot7-12T

Pilot10-15T

凍干面積

0.42

0.56

0.84

1.05

22西林瓶裝量(20ML

≥900

≥1170

≥1500

≥2100

16西林瓶裝量(5ML

≥1700

≥2210

≥3100

≥4100

冷阱溫度(空載)

-85

真空度(空載)

≤1Pa

板層溫度(空載)

-55

板層制冷方式

硅油循環(huán)

板層數(shù)量

3+1

4+1

4+1

5+1

板層尺寸(mm

350*400

350*400

350*600

350*600

捕水能力

6L

8L

12L

10L

凍干效率

3L/24H

5L/24H

7L/24H

10L/24H

板層間距

100mm

80mm

90mm

100mm

穿墻隔離

凍干曲線擬合度

100%

100%

100%

100%

晶型控制

蒸汽分壓控制

升華結束判定

凍干終點測試

壓塞

液壓

整機尺寸 (約)

W860*D1400*H1800

W860*D1400*H1800

W860*D1700*H1900

W860*D1700*H1900

 

 

 

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