国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網>技術中心>操作使用>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

Raji-LUC人Burkitt`s淋巴瘤熒光素酶標記細胞處理方法

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2020年07月19日 19:46  

Raji-LUC人Burkitt`s淋巴瘤熒光素酶標記細胞處理方法

【背景資料】 見細胞說明書
【產品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國內外著名大學建系
"公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養(yǎng)PBS量是10%,如果出現(xiàn)細胞狀態(tài)不良情況,可以提高PBS量到15%,SHEE人永生化食管上皮細胞待細胞穩(wěn)定后,調回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養(yǎng),都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
一、售前
         上海琛藝實業(yè)專業(yè)為國內科研提供高品質細胞和優(yōu)質服務,QC檢測合格后發(fā)貨保證細胞狀態(tài)良好,發(fā)貨前保證質量。
 
二、售后
         收到細胞7天內出現(xiàn)狀態(tài)不佳等情況請及時反饋,會有技術同步指導操作協(xié)助解決,如仍未養(yǎng)活免費重發(fā)。建議及時保種,有備無患!
 
三、細胞生長條件:
培養(yǎng)條件   
GIBCO(培養(yǎng)基90% +10%FBS)
溫度                   
                    37℃
空氣條件  
5% CO2,,95% AIR
傳代方法
1:2傳代,2~3天換液
凍存條件
90%FBS+10%DMSO
 
四、細胞收到后處理
    細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸的好辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的*培養(yǎng)液移入廢液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml*培養(yǎng)液,懸浮細胞需離心處理,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

Raji-LUC人Burkitt`s淋巴瘤熒光素酶標記細胞處理方法


五、細胞培養(yǎng)步驟
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中,加入約6ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
 
1、貼壁細胞,傳代參考如下:
①. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
②. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
③. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
 
④. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。操作步驟:
請收到細胞后,在倒置鏡下(好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二) (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1.棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,之后翻轉培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。

其他細胞如下:

293-LUC(HEK293-LUC)人胚腎細胞-熒光素酶標記

293-GFP(HEK293-GFP)人胚腎細胞-綠色標記

A549-LUC肺腺癌-熒光素酶標記

Bel-7402-GFP人肝癌細胞-綠色標記

C918-GFP人眼脈絡黑色素瘤細胞-綠色標記

CT26.WT-LUC小鼠結腸癌細胞-熒光素酶標記

CT26.WT-GFP小鼠結腸癌細胞-綠色標記

hct116/L-LUC人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株-熒光素酶標記

hct116/L-GFP人結腸癌耐奧沙利鉑細胞株-綠色標記

HCT-116-LUC低分化結腸腺癌-熒光素酶標記

HCT-116-GFP低分化結腸腺癌-綠色標記

Hep3B-GFP人肝癌-綠色標記

LLC-LUC小鼠肺癌細胞-熒光素酶標記

LLC-GFP小鼠肺癌細胞-綠色標記

SGC-7901-GFP人胃癌細胞-綠色標記

SMMC-7721-GFP人肝癌細胞-綠色標記

SW620-LUC人結腸癌細胞-熒光素酶標記

SW620-GFP人結腸癌細胞-綠色標記

ARPE19-GFP人視網膜上皮細胞-綠色標記

 

 

免責聲明

  • 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
  • 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
阳西县| 雷州市| 昆山市| 定日县| 邯郸县| 夏河县| 伊川县| 望都县| 西昌市| 泸定县| 石家庄市| 霍州市| 安仁县| 涞源县| 信宜市| 军事| 启东市| 许昌市| 衡南县| 高陵县| 永年县| 凌源市| 舟山市| 扬州市| 运城市| 郑州市| 宿松县| 洞口县| 兴化市| 嘉荫县| 衢州市| 开鲁县| 客服| 金坛市| 普兰店市| 曲沃县| 云南省| 建湖县| 荥经县| 文化| 金华市|