談一談T2毒素免疫親和柱的原理及操作者應(yīng)注意事項(xiàng)
T2毒素是由多種鐮刀菌產(chǎn)生的一種霉菌毒素。主要污染小麥、大麥、玉米等糧食作物及其制品,對(duì)人類健康及畜牧業(yè)構(gòu)成了較大危害。T-2毒素主要影響血液,肝臟,腎臟,胰腺肌肉及淋巴細(xì)胞的功能,T-2毒素中毒后的一般臨床癥狀為厭食、嘔吐、腹瀉、生長(zhǎng)停滯、繁殖和神經(jīng)機(jī)能障礙等。
T2毒素免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的T2毒素,從而對(duì)T2毒素樣品起到非常針對(duì)性的純化作用,過(guò)柱凈化后的樣品液可直接用于液相進(jìn)行T2毒素含量的檢測(cè)。親和層析柱與HPLC配合使用可達(dá)到快速測(cè)定的目的,以改善信噪比,可提高檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度。
T2毒素免疫親和柱的原理:
待測(cè)樣品中的T2毒素經(jīng)由提取、過(guò)濾、稀釋等步驟釋放出來(lái),隨提取液緩慢通過(guò)含有T2毒素單克隆抗體的免疫親和層析柱并與之特異結(jié)合。洗去未被結(jié)合的其他無(wú)關(guān)物質(zhì)后,加入甲醇,使T2毒素抗原抗體復(fù)合物進(jìn)行解離,將赭曲霉毒素洗脫下來(lái),獲得純凈的T2毒素用于進(jìn)一步的檢測(cè)。
T2毒素免疫親和柱的操作者應(yīng)注意事項(xiàng):
1、T2毒素為有毒物質(zhì),需戴手套操作。
2、使用過(guò)的容器及含有T2毒素的液體用次氯酸鈉溶液浸泡過(guò)夜。
3、過(guò)了有效日期的免疫親和柱不可使用。
4、親和柱用于冷藏保存,不可冷凍。
5、免疫親和層析柱在使用前需回至室溫。
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