Invitrogen品牌代理山羊抗豚鼠IgG（H + L）高度交叉吸附二級(jí)抗體，Alexa Fluor 488的產(chǎn)品說(shuō)明。

貨號(hào)：A-11073

產(chǎn)品特定信息
為了大程度地減少交叉反應(yīng)，已對(duì)這些山羊抗豚鼠IgG（H + L）完整二級(jí)抗體進(jìn)行了親和純化，并針對(duì)牛，雞，山羊，倉(cāng)鼠，人，小鼠，兔，大鼠和綿羊的血清進(jìn)行了交叉吸附進(jìn)行共軛。交叉吸附或預(yù)吸附是純化步驟，可提高抗體的特異性，從而提高靈敏度并減少背景染色。使第二抗體溶液通過(guò)含有固定血清的柱基質(zhì)來(lái)自潛在交叉反應(yīng)物種的蛋白質(zhì)。只有非特異性結(jié)合的二抗被捕獲在色譜柱中，高特異性的二抗流過(guò)。這個(gè)額外步驟的好處在多重/多色實(shí)驗(yàn)（例如流式細(xì)胞術(shù)）中很明顯，在其中可能與其他一抗發(fā)生交叉反應(yīng)，或者在組織/細(xì)胞熒光染色實(shí)驗(yàn)中可能存在內(nèi)源性免疫球蛋白。

Alexa Fluor染料是當(dāng)今受信任的熒光染料之一。Invitrogen™Alexa Fluor 488染料是一種明亮的綠色熒光染料，具有激發(fā)光，非常適合488 nm激光線。為了在成像和流式細(xì)胞儀中穩(wěn)定產(chǎn)生信號(hào)，Alexa Fluor 488染料在很寬的摩爾范圍內(nèi)對(duì)pH值不敏感。具有高熒光量子產(chǎn)率和高光穩(wěn)定性的探針可以以高靈敏度檢測(cè)低豐度生物結(jié)構(gòu)。Alexa Fluor 488染料分子可以高摩爾比連接到蛋白質(zhì)上，而無(wú)需明顯的自猝滅，可實(shí)現(xiàn)更亮的結(jié)合物和更靈敏的檢測(cè)。每個(gè)綴合物的標(biāo)記程度通常是每個(gè)IgG分子2-8個(gè)熒光團(tuán)分子；每個(gè)產(chǎn)品批次的分析證書(shū)上均會(huì)標(biāo)明確切的標(biāo)簽等級(jí)。

使用結(jié)合物溶液：使用前，將蛋白結(jié)合物溶液在微量離心機(jī)中短暫離心；僅將上清液添加到實(shí)驗(yàn)中。此步驟將有助于消除在存儲(chǔ)過(guò)程中可能形成的任何蛋白質(zhì)聚集體，從而減少非特異性背景染色。由于染色方案隨應(yīng)用而變化，因此應(yīng)憑經(jīng)驗(yàn)確定抗體的適當(dāng)稀釋度。對(duì)于熒光團(tuán)標(biāo)記的抗體，對(duì)于大多數(shù)免疫組織化學(xué)和流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用而言，終濃度為1-10 µg / mL應(yīng)該是令人滿(mǎn)意的。