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動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)方法硬核總結(jié):大小鼠跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)

來(lái)源:上海欣軟信息科技有限公司   2020年08月24日 13:13  

一.實(shí)驗(yàn)原理

在一個(gè)開(kāi)闊的空間,動(dòng)物大部分時(shí)間都在邊緣與角落里活動(dòng)。在方形空間中心設(shè)置一個(gè)高的平臺(tái),底部鋪以銅柵,銅柵通電。當(dāng)把動(dòng)物放在平臺(tái)上時(shí),它幾乎立即跳下平臺(tái),并向四周進(jìn)行探索。如果動(dòng)物跳下平臺(tái)時(shí)受到電擊,其正常反應(yīng)是跳回平臺(tái)以躲避傷害性刺激。多數(shù)動(dòng)物可能再次或多次跳至銅柵上,受到電擊后又迅速跳回平臺(tái)。多次訓(xùn)練后,動(dòng)物形成記憶而不跳下站臺(tái)。藥物或者其他因素(如腦損傷)的改變會(huì)增強(qiáng)或者削弱這種記憶保存時(shí)間。

二.實(shí)驗(yàn)裝置

跳臺(tái)箱材質(zhì)采用無(wú)味的ABS塑料材質(zhì)或者醫(yī)用有機(jī)板,顏色為黑色或者灰色。上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的跳臺(tái)箱包括一個(gè)30cm*30cm,底部可通電的實(shí)驗(yàn)箱、一個(gè)直徑為5cm/10cm 的平臺(tái)以及SuperSdt跳臺(tái)視頻分析軟件(型號(hào):XR-3TB),通常平臺(tái)高度與直徑一樣,尺寸可定制。實(shí)驗(yàn)箱上方安裝錄像監(jiān)控器(視頻盒),以錄制動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)箱中的活動(dòng)情況,以供日后分析使用。

三.實(shí)驗(yàn)方法

1. 在實(shí)驗(yàn)前一個(gè)星期,每天撫摸實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1-5min,連續(xù)7天,(這個(gè)時(shí)間段需要實(shí)驗(yàn)員根據(jù)實(shí)際情況來(lái)定制)借以消除實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)實(shí)驗(yàn)者的恐懼。

2. 訓(xùn)練期:訓(xùn)練時(shí)將動(dòng)物放入跳臺(tái)箱內(nèi)適應(yīng)3-5min,然后底部電棒通交流電,動(dòng)物受到電擊,正常反應(yīng)是跳上平臺(tái)躲避傷害性刺激。訓(xùn)練期內(nèi)如果該動(dòng)物未跳下平臺(tái)則棄去不用。

3. 試驗(yàn)期:訓(xùn)練后根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?在一定期間(一般24h)將動(dòng)物再次放在平臺(tái)上,觀察3-5min,記錄動(dòng)物第yi次從平臺(tái)跳下所需的時(shí)間,即跳臺(tái)潛伏期(step down latency,SDL)和觀察期內(nèi)跳下平臺(tái)的次數(shù),即錯(cuò)誤次數(shù)(error times,ET),若觀察期內(nèi)動(dòng)物未跳下平臺(tái),ET記為0,SDL記為觀察時(shí)間(3-5min)。

四.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

主要應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù):

1.觀察時(shí)間,動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)箱中活動(dòng)的總時(shí)間

2.潛伏期,實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后動(dòng)物第yi次從平臺(tái)上跳下的時(shí)間

3.錯(cuò)誤次數(shù),整個(gè)觀察期內(nèi)動(dòng)物一共從平臺(tái)上“成功跳下”來(lái)的次數(shù),“成功跳下”的行為需要滿(mǎn)足SuperSdt軟件中定義的刺激延遲時(shí)間閾值

4.安全區(qū)總時(shí)間,動(dòng)物停留在平臺(tái)上的時(shí)間

5.刺激區(qū)總時(shí)間,動(dòng)物在電擊區(qū)域的時(shí)間,也稱(chēng)為錯(cuò)誤時(shí)間

其中潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)指標(biāo)作為評(píng)價(jià)學(xué)習(xí)記憶能力的重要指標(biāo),通常這兩個(gè)指標(biāo)高度相關(guān)。

五.注意事項(xiàng)

1. 為了提高動(dòng)物成功躲避電擊跳上平臺(tái)行為,通常在測(cè)試前先將動(dòng)物放在實(shí)驗(yàn)箱中適應(yīng)5min后再放入迷宮。

2. 實(shí)驗(yàn)前一周每天撫摸大鼠可以明顯減少大鼠對(duì)實(shí)驗(yàn)者的恐懼感以及無(wú)關(guān)刺激對(duì)實(shí)驗(yàn)箱中動(dòng)物的影響。

3. 盡管還沒(méi)有證據(jù)證實(shí)在一天中不同時(shí)間對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否有明顯的影響。但是結(jié)合實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)建議實(shí)驗(yàn)動(dòng)物檢測(cè)時(shí)間hao在上午9:00至下午15:00之間進(jìn)行,如果有條件,且需要重復(fù)多次檢測(cè),盡量在每天同一時(shí)間段檢測(cè),以減少數(shù)據(jù)的波動(dòng)。

4. 如果實(shí)驗(yàn)中尤其是訓(xùn)練期時(shí),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一直不成功跳上平臺(tái)或者跳上平臺(tái)后不再跳下來(lái),都應(yīng)當(dāng)考慮剔除。

5. 對(duì)于實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的動(dòng)物一半身體在平臺(tái)上,一半身體去觸碰電柵欄區(qū)域,雖然是小概率,也應(yīng)當(dāng)考慮剔除數(shù)據(jù)或者修改平臺(tái)尺寸(通常是平臺(tái)高度與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物身長(zhǎng)不匹配)。

6. 動(dòng)物的回避性反應(yīng)差異較大,因此需要檢測(cè)大量的動(dòng)物。如需減少差異或少用動(dòng)物,可對(duì)動(dòng)物進(jìn)行預(yù)選或按學(xué)習(xí)成績(jī)好壞分檔次進(jìn)行試驗(yàn)。

7. 電流刺激大小需要根據(jù)每批次動(dòng)物的應(yīng)激情況來(lái)調(diào)節(jié),通常小鼠刺激大小為0.2-0.5ma,大鼠為0.6-0.9ma左右。

8. 隔音箱的作用是大限度的降低外界噪音、光線以及人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)本身的干擾,隔音箱屬于選配組件,情況允許下建議配置。

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