白蛋白(ALB)放免試劑盒操作步驟:
1. 將所需試劑及微孔板取出,放置室溫(20~25℃)30min以上,液體試劑使用前均須搖勻。
2. 取出所需數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放回鋁箔袋中,放置于2~8℃冷藏。不可冷凍。
3. 配置好的洗滌工作液在使用前也需回溫。
4. 將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔編號,建議每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2 孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5. 每孔加入250μL 左右洗滌液,洗滌液不得溢出,放置40s左右,甩掉洗滌液,在吸水紙上拍干。
6. 分別加入標(biāo)準(zhǔn)溶液/待測樣液50μL 到對應(yīng)的微孔中,加入酶標(biāo)物50μL/孔,后再加入抗試劑50μL/孔,輕輕震蕩混勻,遮蓋后室溫(25℃)避光反應(yīng)20min。
7. 小心揭開蓋板,甩掉反應(yīng)液,加入洗滌液250μL/孔充分洗滌5 次,每次間隔40s,用吸水紙拍干。
8. 每孔分別加入底物液和顯色液各50μL,輕輕震蕩混勻,遮蓋后室溫(25℃)避光顯色15min。
9. 加入終止液50μL/孔,輕輕震蕩混勻,設(shè)酶標(biāo)儀于450nm處讀取每孔OD 值。
(若無酶標(biāo)儀,則不加終止用目測法可進(jìn)行判定)。
★注:該試劑盒佳反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。若環(huán)境溫度高于或低于25℃,請適當(dāng)縮短或增加反應(yīng)及顯色時間。
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