土壤過(guò)氧化氫酶檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
土壤過(guò)氧化氫酶檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
貨號(hào):YJS2222
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
S-CAT 是土壤微生物代謝的重要酶類,在 H2O2 清除系統(tǒng)中具有重要作用。
分光光度法
H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰,通過(guò)測(cè)定與土壤反應(yīng)后溶液在此波長(zhǎng)下吸光度的變化,即可反應(yīng) S-CAT 活性的高低。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體×5 瓶,4℃保存;臨用前每瓶加入 9.9mL 蒸餾水充分溶解后待用。用不完的試劑 4℃保存。試劑二:粉劑×1 瓶,4℃保存;臨用前加入 2mL 蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑 4℃保存。
試劑三:液體×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
試劑名稱 | 測(cè)定管 | 無(wú)基質(zhì)管 | 無(wú)土管 |
風(fēng)干土樣(g) | 0.1 | 0.1 |
|
試劑一(μl) | 1000 |
| 1000 |
雙蒸水(μl) |
| 1000 |
|
25℃振蕩培養(yǎng) 20min | |||
試劑二(μl) | 25 | 25 | 25 |
混勻 8000g,常溫離心 5min,取全部上清 | |||
試劑三(μl) | 120 | 120 | 120 |
混勻,用蒸餾水調(diào)零,240nm 處記錄各管 A 值。
每個(gè)測(cè)定管要設(shè)一個(gè)無(wú)基質(zhì)管,無(wú)土管只要做一管。
S-CAT 活力的計(jì)算:
單位的定義:每天每 g 風(fēng)干土樣催化 1μmol H2O2 降解定義為一個(gè)酶活力單位。
計(jì)算公式:S-CAT(U/g)=[(A 無(wú)土管-A 測(cè)定管+A 無(wú)基質(zhì)管)×V 反總÷(ε×d)×106]÷W÷T
=18.9×(A 無(wú)土管-A 測(cè)定管+A 無(wú)基質(zhì)管)
V 反總:反應(yīng)體系總體積,1.145×10-3L;ε:過(guò)氧化氫摩爾消光系數(shù),4.36×104L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;
T:反應(yīng)時(shí)間,20min=1/72d;W:樣本質(zhì)量,0.1g。
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用!請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測(cè)等用途!
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