直接PCR——PCR反應中的快速之“王”

PCR技術是一種包括生命科學在內(nèi)多個領域頻繁使用的一種技術。而PCR技術在發(fā)展過程中有了幾次大的技術革新，如熱穩(wěn)定Taq酶的發(fā)現(xiàn)、自動控溫PCR儀的推出、PCR mix的出現(xiàn)，每一次革新的出現(xiàn)都使得PCR技術更加簡便與易于操作。

Part1：直接PCR所謂何意？

直接PCR（Direct PCR）是一種不經(jīng)核酸提取而直接使用動物或植物組織等直接進行擴增的反應。在許多方面，直接PCR的工作方式類似于常規(guī)PCR。主要區(qū)別是直接PCR中使用的定制緩沖液，樣本可不經(jīng)過核酸抽提，直接進行PCR反應，但對于參與直接PCR反應酶的耐受性和buffer的兼容性有相對應的要求。盡管常見的樣品中或多或少都會存在PCR抑制劑，但在酶和buffer的作用下直接PCR仍可實現(xiàn)可靠的擴增。而傳統(tǒng)的PCR反應需要以高質(zhì)量的核酸為模板進行反應，如模板中含有蛋白以及其他雜質(zhì)時就會抑制PCR反應的順利進行。

Part2“直”接了當

核酸提取技術愈發(fā)成熟，對應所需要的配套儀器就越固化，技術的一體化導致單次的檢測成果過高。而一些欠發(fā)達地區(qū)的并不具備成熟的核酸提取配套儀器及實驗室，以及在性疾病流行大背景下，直接PCR的需求劇增。

目前的PCR檢測方法所需時間較長，樣品如咽拭子、血液等需經(jīng)核酸提取后再進行檢測及報告發(fā)放，整體拉長了診斷時間。直接PCR使用簡單，不需要額外培訓專業(yè)的檢測人員，可直接將樣品簡單稀釋即可同時還避免了因如核酸提取操作等出現(xiàn)的假陰性結果。

Part 3： 狀況“直”出

早在1993年之前，直接PCR就被用于微生物領域中分析中，今天分子實驗室中所采用的菌落PCR鑒定就是直接PCR法的直接的體現(xiàn)。可直接樣品簡單處理或者稀釋即可進行PCR反應。

2019年新///冠病毒出現(xiàn)，并且迅速席卷造成重大損失。隨后非洲豬瘟又卷土重來，造成生豬產(chǎn)業(yè)的重大損失。想要控制疫情，檢測是重中之重。而在此次的疫情期間，分子檢測揭開了其神秘的面紗進入人們的視野中。一方面是疫情期間分子檢測的需求攀升，另一方面是攀升的需求使得衛(wèi)生機構的運行負荷驟增。因此開發(fā)快速檢測技術是各家IVD企業(yè)爭相搶奪的高地。而直接PCR更是快速分子檢測技術中的一匹黑馬。

直接PCR的核心就是具有高度耐受的聚合酶，可直接對樣本中的核酸分子進行檢測。翊圣生物研發(fā)的直接PCR系列具有優(yōu)////秀的耐受抑制組分，有針對不同樣品如動物組織、動物全血等PCR產(chǎn)品，助力快速檢測。

HB200910