自抽連續(xù)離心技術(shù)是1981年聯(lián)邦德國(guó)的L.deMaeyer教授在歐洲分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室(European Molecular Biology Laboratory,Heidelberg,West Germany)提出。在該技術(shù)中影響離心分離效果的操作參數(shù)只有一個(gè),即離心機(jī)的轉(zhuǎn)速。這樣,實(shí)現(xiàn)了影響離心效果的操作參數(shù)從兩個(gè)到一個(gè)的進(jìn)步。
目前制備離心根據(jù)進(jìn)樣是否連續(xù)可分為兩種:分批離心(batch centrifugation)和連續(xù)離心(continuous-flow centrifugation)。在分批離心中,分離效果受離心機(jī)轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)速和分離時(shí)間的影響,在連續(xù)離心中則與轉(zhuǎn)速和流量有關(guān)。
假如要把均勻地懸浮在某一液體中大小不同的兩種顆粒分離開,在分批離心(如在差速離心和速率區(qū)帶離心)中,離心機(jī)轉(zhuǎn)速和分離時(shí)間這兩個(gè)操作參數(shù)的任何變化都將影響分離效果;同樣,在連續(xù)離心中,轉(zhuǎn)速和流量任何變化也將影響分離效果。通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)速和分離時(shí)間或轉(zhuǎn)速和流量?jī)蓚€(gè)操作參數(shù)分別嚴(yán)格控制,才會(huì)降低分離不清的現(xiàn)象,即“污染”。
自抽連續(xù)離心的目的是把離心場(chǎng)的離心分離特性與離心抽吸作用結(jié)合,產(chǎn)生自抽連續(xù)流動(dòng)離心(self-fuction continuous-flow centrifugation,亦稱self-pumping continous-flow centrifugation,以后簡(jiǎn)稱自抽連續(xù)離心),使其轉(zhuǎn)速是*操作參數(shù)。
在自抽連續(xù)離心中,離心機(jī)分離效果主要取決于懸浮液中顆粒的特性和轉(zhuǎn)子流體通道的幾何形狀。選擇適當(dāng)?shù)膸缀涡螤?,可使具有某沉降系?shù)的顆粒的澄清度對(duì)轉(zhuǎn)速變化不敏感,即轉(zhuǎn)速的變化對(duì)離心效果的影響小。
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