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微量法酸性土壤

來源:上海研謹生物科技有限公司   2020年09月30日 11:38  

規(guī)格:100 管/96 樣

酸性土壤*磷試劑盒說明書

微量法

注意:正式測定之前選擇 2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義

*磷是土壤中可被植物吸收的磷組分,包括全部水溶性磷、部分吸附態(tài)磷及有機態(tài)磷, 土壤中*磷是限制植物生長主要因子之一。

測定原理

用雙酸法提取酸溶性磷和吸附態(tài)磷,用鉬銻抗比色法測定。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板、震蕩儀。

試劑組成和配制

提取液:液體 105mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 支,4℃避光保存。臨用前加 0.2mL 蒸餾水溶解。試劑二:液體 0.4mL×1 支,4℃保存。

工作液:臨用前將試劑一和試劑混合,加 19.4mL 蒸餾水混勻。

樣本處理

新鮮土樣風干,過20目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5的比例(建議稱取約0.2g土樣,加入1mL提取液),振蕩提取 1h,10000g ,25℃離心10min,取上清液待測。

測定操作表

 

空白管

測定管

樣本(μL)

 

20

提取液(μL)

20

 

工作液(μL)

180

180

充分混勻,25℃靜置 30min

于微量石英比色皿/96 孔板,蒸餾水調(diào)零,測定 700nm 處吸光值 A,分別記為 A 空白管和 A

測定管,△A=A 測定管-A 空白管

注意:空白管只需測定一次。

計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下 標準曲線:y=0.2585x-0.3007,R2=0.9903

*磷含量(mg/kg)=(△A+0.3007)÷ 0.2585×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)

= 38.68×(△A+0.3007)÷W

V 反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.02mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g

b. 用 96 孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y=0.1293x-0.3007,R2=0.9903

 

*磷含量(mg/kg)=(△A+0.3007)÷ 0.1293×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)

= 77.36×(△A+0.3007)÷W

V 反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.02mL;V 樣總:加入提取液體積,1mL,W:樣本質(zhì)量,g

注意事項

1. 配好的試劑 3 天內(nèi)使用完。

2. 低檢出限為 1.16mg/g。

 

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