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ELISA試劑盒原理與結(jié)構(gòu)處理

來源:上海撫生實業(yè)有限公司   2020年10月21日 10:39  

ELISA試劑盒原理:

免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何優(yōu)質(zhì)的診斷試劑離不開優(yōu)質(zhì)的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用得到的,而抗原ELISA試劑盒或抗體的如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。

ELISA試劑盒標(biāo)本的采集:

能夠應(yīng)用ELISA試劑盒的樣本種類很多,有血清,血漿,細(xì)胞上清,細(xì)胞裂解液,尿液,關(guān)節(jié)滑液,腦脊液,肺泡灌洗液,各種組織的組織勻漿;采集和處理的方式都不相同。下面就列出了ELISA試劑盒收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。

ELISA試劑盒處理和保存:

1、 真空采血針采集2ml新鮮血液,加入無菌試管中。

2、 采血后室溫靜置1小時。

3、 將采集血液用離心機4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆谩?/p>

5、 根據(jù)你的實驗需要,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA試劑盒。  

ELISA試劑盒組成結(jié)構(gòu):

一、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱量和肉毒素的試管。收集血液后,1000*g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心的分離。

二、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

三、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

四、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。

五、 保存:如果樣品ELISA試劑盒不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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