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瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質(zhì)制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經(jīng)化學(xué)修飾后熔點(diǎn)降低的低熔點(diǎn)瓊脂糖，瓊脂糖的熔點(diǎn)在62-65°C之間，融化后在37°C下可維持液態(tài)數(shù)小時(shí)，30°C時(shí)凝固成膠。多用于對(duì)染色體DNA在凝膠內(nèi)進(jìn)行原位酶切及DNA的片段回收。瓊脂糖凝膠 由于孔徑大常用于大分子蛋白質(zhì)、DNA的分離。
瓊脂糖是由瓊脂分離制備的鏈狀多糖，其結(jié)構(gòu)單元是D-半乳糖和3.6-脫水L半乳糖。許多瓊脂糖鏈依氫鍵及其它力的作用使其互相盤繞形成繩狀瓊脂糖束，構(gòu)成大網(wǎng)孔型凝膠。因此該凝膠適合于免疫復(fù)合物、核酸與核蛋白的分離、鑒定及純化。在臨床生化檢驗(yàn)中常用于LDH、CK等同工酶的檢測(cè)。
瓊脂糖凝膠電泳儀的使用步驟：
1、用蒸餾水將制膠工具洗干凈，準(zhǔn)備好制膠平板，用瓊脂將模具邊緣封閉， 架好梳子；
2、根據(jù)要分離的樣品大小配制合適濃度的瓊脂糖凝膠。準(zhǔn)確的稱取一定量的瓊脂糖干粉，加入到合適體積的錐形瓶中，加入一定量的電泳緩沖液，放入到微波爐內(nèi)加熱融化，冷卻片刻；
3、融化后的瓊脂溶液搖晃混勻，倒入電泳槽中，等其凝固；
4、室溫下凝固30-40min左右，小心的拔出梳子，取出凝固好的凝膠放入電泳槽內(nèi)，準(zhǔn)備上樣；
5、在電泳槽中倒入電泳緩沖液，沒(méi)過(guò)膠面1mm左右，去除膠孔內(nèi)的氣泡；
6、上樣，5ulDNA樣品加入1ul上樣緩沖液和染料，用搶混勻后加入到凝膠孔內(nèi)；
7、上樣結(jié)束，接通電源，紅色正極，黑色負(fù)極， DNA樣品有負(fù)極往正極運(yùn)動(dòng)，加樣孔側(cè)為負(fù)，40-50v電壓，電壓30敏左右即可；
8、電壓結(jié)束，關(guān)閉電源，凝膠成像儀上觀察電壓位置并比對(duì)marker判斷大小。
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