小鼠CD34分子CD34酶聯(lián)檢測試劑盒操作流程:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
注意事項:
在收集標(biāo)本前必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成分是否足夠穩(wěn)定,我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測,對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的標(biāo)本,請及時儲存在4℃的條件下備用,如有特殊原因需要周期手機(jī)標(biāo)本,請在造模取材后,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保持。因冰室與室溫存在一定的溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質(zhì)量,所以請避免反復(fù)凍融。有代測需求的客戶,取材前請務(wù)必和我司銷售人員索要說明書,具體操作事項請與我司技術(shù)人員保持。
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