中華絨螯蟹呼腸孤病毒RNA核酸檢測(cè)試劑盒操作步驟：

1：樣品準(zhǔn)備：取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清（貼壁和懸浮細(xì)胞都可以,*已培養(yǎng)48小時(shí)以上），在16000g離心5分鐘，小心棄去上清，避免丟失沉淀（沉淀量有可能很少，目視看不到）。將沉淀用無菌PBS重懸，在16000g離心5分鐘，同樣小心棄去上清，如此反復(fù)用無菌PBS洗三次。*將獲得的沉淀用100微升超純水重懸，置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個(gè)月。

2：PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備：

待各組份融化后先瞬時(shí)離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系，每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽性對(duì)照，測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過程中應(yīng)注意無菌，戴口罩，并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染，推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。

檢測(cè)特異性與靈敏度:

高性能的UNICONTM Taq熱啟動(dòng)酶及組分優(yōu)化的反應(yīng)體系保證高度的特異性擴(kuò)增，提升了擴(kuò)增效率，使得UNICONTM qPCR Master Mix具有*的檢測(cè)靈敏度。以人293T細(xì)胞cDNA為模板，在相同條件下擴(kuò)增低拷貝hbcl6基因，與同類產(chǎn)品相比，UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的擴(kuò)增特異性、更高的擴(kuò)增效率及更好的復(fù)孔重復(fù)性，檢測(cè)靈敏度更高。