手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
常用的封鎖劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白，也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封鎖劑的。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。ELISA試劑盒抗原或抗體包被時(shí)所用的濃度較低，吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的曠地空閑，封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑，從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。
包被用抗原或抗體的濃度，包被的溫度和時(shí)間，包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)的特點(diǎn)和材料的性質(zhì)而選定。通常在ELISA板孔中加入包被液后，在4-8℃冰箱中放置過(guò)夜，37℃中保溫2小時(shí)被以為具有平等的包被效果。特別是用單抗腹水直接包被時(shí)，因其中大量非抗體蛋白在包被時(shí)同樣也吸附在固相表面，業(yè)已起到了類(lèi)似封鎖劑的作用。并非所有的ELISA固相均需封鎖，封鎖不當(dāng)反而會(huì)使陰性本底增高。ELISA試劑盒脫脂奶粉也是一種良好的封鎖劑，其大的特點(diǎn)是價(jià)廉，可以高濃度使用（5%）。抗體和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液，也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。
高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當(dāng)作封鎖劑使用，但因?yàn)槟谭鄣某煞輳?fù)雜，而且封鎖后的載體不易長(zhǎng)期保留，因此在試劑盒的制備中較少應(yīng)用。ELISA試劑盒封鎖的手續(xù)與包被相類(lèi)似。一般說(shuō)來(lái)，雙抗體夾心法，只要酶標(biāo)記物是高活性的，操縱時(shí)洗滌*，不經(jīng)封鎖也可得到滿(mǎn)足的結(jié)果。封鎖是否必要，取決于ELISA的模式及詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)前提。
封鎖（blocking）是繼包被之后用高濃度的無(wú)關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過(guò)程。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或錫袋中，在低溫可保留數(shù)月。ELISA試劑盒包被的適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化，每批材料需通過(guò)實(shí)驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。但在間接法測(cè)定中，封鎖一般是不可少的。
上海恒遠(yuǎn)為客戶(hù)提供售前、售中以及售后的全面服務(wù)，您的滿(mǎn)意使我們大的榮幸；源自先進(jìn)的酶聯(lián)免疫技術(shù)，涵蓋國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家的經(jīng)驗(yàn)與智慧。采用精良的技術(shù)和設(shè)備，確保品質(zhì)的同時(shí)，降低成本，為更多有需要的研究人員，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)，保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量，為國(guó)家的科技發(fā)展多做貢獻(xiàn)。多家生物科研基地合作伙伴，實(shí)力團(tuán)隊(duì)傾力打造專(zhuān)注于elisa檢測(cè)試劑盒的生產(chǎn)，研發(fā)，助力您的科研試驗(yàn)!
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來(lái)源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類(lèi)作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購(gòu)中心