紫外分光光度計(jì)原理是分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團(tuán)的信息,可用標(biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。根據(jù)Lambert-Beer定律:A=εbc(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),為液池厚度,c為溶液濃度)可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。
紫外分光光度計(jì)所用比色皿的分類(lèi):
比色皿的制造工藝有兩種:一種是粘合劑粘合而成;另一種是高溫熔融而成。
比色皿的材料通常來(lái)源于石英、熔凝硅石和光學(xué)玻璃。
常用比色皿的形狀有方形、矩形和圓筒形,容量一般為幾毫升。也有用于少量試樣的微型或超微型毛細(xì)管皿。另外還有高、低溫恒溫比色皿。
比色皿按照使用的波長(zhǎng)范圍分:可見(jiàn)光系列(稱(chēng)玻璃比色皿);紫外可見(jiàn)光系列(稱(chēng)石英比色皿);紅外光系列(稱(chēng)紅外石英比色皿)。
紫外分光光度計(jì)所用比色皿的選用:
紫外光度實(shí)驗(yàn)中的比色皿通常使用玻璃比色皿和石英比色皿,玻璃比色皿是用光學(xué)玻璃制成的比色皿,只能用于可見(jiàn)光區(qū),適用于330-1000nm波長(zhǎng)范圍,石英比色皿是用熔融石英(氧化硅)制成的比色皿,既適用于紫外光區(qū),也可用于可見(jiàn)光區(qū),適用于200-400nm波長(zhǎng)范圍。
利用石英和玻璃比色皿在紫外光區(qū)和可見(jiàn)光區(qū)有無(wú)吸收的差異,在紫外光區(qū)時(shí),由于玻璃比色皿強(qiáng)烈吸收紫外光,對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果有影響,石英比色皿不吸收紫外光,不會(huì)影響數(shù)據(jù),因此在紫外光區(qū)不使用玻璃比色皿而使用石英比色皿。而在可見(jiàn)光區(qū),玻璃的影響非常小,可忽略,和石英比色皿一樣均可以使用,但考慮到節(jié)約經(jīng)濟(jì)的因素,由于玻璃比色皿的價(jià)格遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于石英比色皿,通常選擇可見(jiàn)光區(qū)使用玻璃比色皿,紫外光區(qū)使用石英比色皿。
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