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色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球（包括離子交換樹脂）、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達5~16萬/米。對于一般的分析只需5000塔板數(shù)的柱效。
死體積狹義上指的是色譜柱中未被固定相占據(jù)的空隙體積，即色譜柱內(nèi)流動相的體積。廣義上的死體積是指進樣位置（進樣口）到檢測位置（檢測器流通池）這一段的體積（PS:除去色譜柱中填料體積），一旦色譜柱連接，這段體積是不變的（死的）。
死體積狹義上指的是色譜柱中未被固定相占據(jù)的空隙體積，即色譜柱內(nèi)流動相的體積。廣義上的死體積是指進樣位置（進樣口）到檢測位置（檢測器流通池）這一段的體積（PS:除去色譜柱中填料體積），一旦色譜柱連接，這段體積是不變的（死的）。
對于HPLC來說，該如何計算死體積呢。
死體積(dead volume,V0)——由進樣器進樣口到檢測器流動池未被固定相所占據(jù)的空間。它包括4部分：進樣器至色譜柱管路體積、柱內(nèi)固定相顆粒間隙（被流動相占據(jù)，Vm）、柱出口管路體積、檢測器流動池體積。其中只有Vm參與色譜平衡過程，其它3部分只起峰擴展作用。為防止峰擴展，這3部分體積應(yīng)盡量減小。
死時間(dead time,t0)——不保留組分的保留時間。即流動相（溶劑）通過色譜柱的時間。
測量系統(tǒng)死體積通常需要通過實驗進行測量，常用方法是通過進一針和色譜柱固定相沒有任何作用的特殊溶液（方法中會有規(guī)定，例如：尿嘧啶，少量NaNO3或甲醇溶于流動相得到的溶液，也有直接用100％色譜純甲醇進樣的情形）時，就會得到一個色譜峰，由此峰可以測得死時間（t0），這就是t0的實測結(jié)果。
然后通過計算得到系統(tǒng)死體積:死體積（V0) = 死時間t0×流動相的流速F。
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